泄浊除痹方总黄酮对小鼠肾小管上皮细胞增殖与尿酸吸收的影响Δ
原代,高尿酸,1仪器与材料,2试药,3动物,2方法,1泄浊除痹方总黄酮的制备,2小鼠RTECs的原代培养与鉴定,3泄浊除痹方总黄酮对RTECs增殖活性的影响,4泄浊除痹方总黄酮对RTECs尿酸吸收的影
吴新荣,臧路平,刘志刚,孙维峰(广州军区广州总医院药剂科,广州 510010)高尿酸血症(Hyperuricemia)是指血液中的尿酸浓度高于正常水平的一种机体状态,其进一步发展会导致痛风。痛风是一种关节炎症,表现为关节处或者关节周围形成尿酸单钠结晶,促使急性炎症的发作和长期的组织损伤。痛风的长期治疗途径为降低血清和组织中的尿酸浓度。
肾小管上皮细胞(Renal tubular epithelial cells,RTECs)上固定的各种转运体负责肾脏物质的转运,其中尿酸在肾脏中的重吸收作用主要依赖于近端小管上皮细胞膜上表达的尿酸盐阴离子转运体(URAT1)[1]。
泄浊除痹方是多年来临床治疗高尿酸血症的经验方,临床试验表明,该处方对高尿酸血症有良好的治疗作用[2]。为进一步明确该处方中的主要活性成分,本课题组对其有效部位进行了分离[3]。总黄酮是在泄浊除痹方中提取出的有效部位之一,已有文献报道黄酮类化合物对尿酸吸收的影响[4]。本文在此研究基础上,探讨泄浊除痹方总黄酮体外刺激小鼠RTECs对其尿酸吸收功能的影响,为该药降尿酸机制的研究和新药的开发提供新的理论依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
超净工作台(江苏苏净集团有限公司);CO2培养箱(美国Thermo Forma公司);CKX41荧光倒置显微镜(日本Olympus公司);68酶标仪(美国Bio-Rad公司)。
1.2 试药
泄浊除痹方颗粒(广州军区广州总医院药剂科,批号:101118);DMEM/F12培养基、D-Hanks、胎牛血清(美国Hyclone公司);人转铁蛋白、牛胰岛素、表皮生长因子、percoll细胞分离液、尿酸、尿酸检测试剂盒、MTT(美国Sigma公司);I型胶原酶(美国Gibco公司);青霉素(0.48 g∶80万u)、链霉素(0.96 g∶160万u))购自湖北远成药业有限公司;鼠抗人细胞角蛋白18抗体、羊抗鼠IgG(武汉博士德生物工程有限公司);二甲亚砜(DMSO ......
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