熊新，周远大(1.重庆医科大学附属第一医院实验研究中心，重庆400016；2.重庆医科大学附属第一医院药剂科，重庆 400016)

    白血病细胞的多药耐药(Multidrug resistance，MDR)是指白血病细胞同时对多种结构和不同作用机制的抗肿瘤药物产生耐受，从而使化疗失败或复发[1，2]。因此，寻求一种能逆转其MDR的药物对提高化疗效果，延长病人生存期是十分关键的。目前已发现多种药物具有逆转MDR的作用，但大多数逆转药物当达到其逆转浓度时，其毒副作用明显[3，4]，从而大大限制了这些逆转药物的临床应用，近年来研究者们试图从传统中医药的角度寻找逆转白血病MDR的新药[5，6]。

    蟾酥是我国传统的中药材，有改善全身状况、提高机体免疫功能和提升白细胞等作用，同时还具有一定的抗肿瘤的功效，主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥其疗效。李贵新等[7]研究发现，蟾酥注射液能够抑制白血病HL60细胞的增殖并诱导其凋亡，但其作用机制尚不明确。本研究旨在探讨蟾酥注射液逆转耐阿霉素(ADM)的急性髓性白血病细胞(HL60/ADM)MDR的作用及其机制，以期为治疗白血病提供新的辅助药物。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    CO2培养箱(美国Shel Lab公司)；全自动酶标读数仪(美国Biorad公司)；96孔培养板(美国Corning公司)；高效液相色谱(HPLC)仪(美国PerkinElmer公司)。

    1.2 试药

    蟾酥注射液(江苏安格药业，批号：0001208，浓度：1.65 μg·L-1)；ADM标准品(浙江海正药业，批号：H33021980，浓度：100 μg·mL-1)；RPMI-1640培养基(美国Gibco公司)；MTT(美国Sigma公司)；新生胎牛血清(FBS，杭州四季青生物工程材料有限公司)；甲醇(色谱纯，德国Merck公司)；乙腈(分析纯，上海陆都化学试剂厂)。

    1.3 细胞株

    ADM诱导的人急性髓性白血病耐药细胞株HL60/ADM由中国医学科学院血液学研究所提供。

    2 方法

    2.1 细胞培养

    HL60/ADM细胞株置于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中培养。培养条件为37℃、5%CO2、饱和湿度，每2～3 d传代1次，培养基中加入ADM，使其最终浓度为0.2 μg·mL-1，以维持细胞的耐药性，使用前1周停加ADM。取对数生长期细胞进行试验 ......