郭雷静，李鑫，张淑芹，陆思静#(.辽宁医学院，辽宁锦州00；.辽宁医学院附属第一医院，辽宁锦州 00)

    不动杆菌是常见的革兰阴性杆菌之一，为重要的条件致病菌。近年来不动杆菌临床标本分离率和耐药率逐渐升高，其中最受关注的是鲍曼不动杆菌。2009年CHINET[1]数据显示，鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素特别是头孢菌素类耐药率均超过50%，分离率占革兰阴性杆菌第4位；而北京协和医院[2]鲍曼不动杆菌则超过铜绿假单胞菌上升到第2位，仅次于大肠埃希菌，对头孢菌素类耐药率均超过70%。我院2010年共检测出鲍曼不动杆菌62株，其中多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)为38株，占61.29%。目前国内、外多项研究表明，产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)机制是细菌对头孢菌素类抗生素耐药最重要的原因之一。为了解我院MDRAB携带耐药基因状况，笔者对38株MDRAB进行了超广谱酶基因检测，为探讨细菌耐药机制及指导临床合理应用抗生素提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 菌株来源

    2010年辽宁医学院附属第一医院住院患者临床标本不动杆菌共62株，筛选出MDRAB共38株，剔除同一患者相同部位重复分离株。38株MDRAB中，痰液17份，导管痰10份，分泌物3份，胸水、尿液及脓液各2份，血液、脑脊液各1份。

    1.2 主要试剂与仪器

    MicroScan WalkAway 40全自动微生物鉴定系统及其配套的鉴定药敏复合板(美国Dade公司生产)；100 bp ladder DNA marker、琼脂糖纯化试剂盒、dNTP及Taq DNA聚合酶均为大连TaKaRa公司产品；多重聚合酶链反应(PCR)引物由北京奥科鼎盛生物科技有限公司生产；DNA Thermal Cycler 2400为美国Perkin Elmer公司产品。

    1.3 药敏试验方法

    采用微量稀释法测定细菌对抗菌药物的敏感性，根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)2007年版要求进行抗生素敏感性判断，用WHONET 5.4软件分析结果。抗菌药物品种分别为头孢吡肟(FEP)、头孢曲松(CRO)、头孢噻肟(CTX)、头孢他啶(CAZ)、氨苄西林/舒巴坦(SAM)、哌拉西林(PIP)、替卡西林/克拉维酸(TCC)、复方磺胺甲唑(SXT)、环丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LVX)、亚胺培南(IPM)、庆大霉素(GEN)、妥布霉素(TOB)、阿米卡星(KAN) ......