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编号:187399
金属硫蛋白在参环毛蚓不同组织中的表达研究Δ
http://www.100md.com 2012年12月3日 中国药房 2012年第15期
免疫组化,染色,重金属,1仪器与材料,2试药,3动物,4土壤,2方法,1DAB工作液的配制,2试验土壤的配制和重金属诱导养殖试验,3所用标本的前期处理,4免疫组化反应,3结果,1MT在肠道中的表达,2MT在表皮中的表
     吴波,李薇,江庆萍,喻良文,张惠球(.广州医学院药学系,广州508;.广州中医药大学中药学院,广州 50006)

    参环毛蚓Pheretima aspergillum(E.Perrier)属钜蚓科动物,药材习称“广地龙”,在《中国药典》收载的4个地龙来源中被认为品质最优,也是广东省著名的道地药材。目前,参环毛蚓仍主要依靠野生资源,加上不同环境条件以及采收加工技术的影响,造成药材质量极不稳定,其中重金属超标问题一直难以控制。目前,国内、外学者大多从生态毒理学的角度研究不同种系的毛蚓对土壤重金属的生物特性变化,并着眼于将毛蚓当作环境污染的指示生物或作为生态修复的工具,较少以改善药用资源为目的,进行重金属污染对药用毛蚓的相关研究[1]。笔者拟应用免疫组化研究金属硫蛋白(Metallothionein,MT)在参环毛蚓不同组织中的表达,以评价重金属镉的污染对参环毛蚓的影响,探索参环毛蚓对重金属镉在体内的生物富集机制,并为控制参环毛蚓体内重金属离子富集或加速其排泄提供依据。这对于从源头上解决参环毛蚓的重金属超标问题具有重要意义。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    CX31型显微镜、FE5000型数码相机(日本Olympus公司);HM 355 S型全自动轮转切片机(德国Microm公司)。

    1.2 试药

    嗜铬素A(英国Novocastra公司,批号:14301305);Chem-MateTMEnVision+/HRP Detection Kit(基因科技(上海)有限公司,批号:25 J1776647490013);二氨基联苯胺(DAB,包含B、C液,上海工硕生物技术有限公司);福尔马林、氯化镉、过氧化氢、二甲苯、柠檬酸三钠、柠檬酸、无水乙醇、氯化钠、氯化钾、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸(EDTA)等试剂均为分析纯。

    1.3 动物

    参环毛蚓采自广东省从化市,由广州中医药大学中药学院喻良文教师提供,经广州中医药大学吴文如讲师鉴定为真品。选择体型健壮、活力较强 ......

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