王丽红，伟忠民(1.辽宁医学院，辽宁锦州121001；2.辽宁医学院附属第一医院，辽宁锦州121000)

    秦皮为常用中药，始载于《神农本草经》，列为中品，以后历代主要本草均有记载。2010年版《中国药典》收载了4种秦皮，视为正品，来源为木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance、白蜡树F.chinensis Roxb.、尖叶白蜡树F.szaboana Lingelsh.或宿柱白蜡树F.stylosa Lingelsh.的干燥枝皮或干皮[1]。秦皮乙素(Esculetin)为秦皮的有效成分之一。现代药理学研究表明，秦皮有抗病原微生物、抗炎、镇痛和抗肿瘤等作用[2]。前期体外细胞试验证明，秦皮乙素对人肝癌细胞有杀伤作用，笔者进一步研究秦皮乙素对小鼠肝癌皮下瘤生长的抑制和对相关凋亡基因的影响，探讨其抗癌的相关机制。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    Napro-6100型CO2培养箱(美国杜邦公司)；YG-875 B型无菌超净工作台(上海医疗器械厂)；KA-1000 C型飞鸽离心机(上海安亭科学仪器厂)；CX21型双目生物显微镜(日本Olympus公司)；WD-9413 B型凝胶成像分析仪(上海圣科仪器设备有限公司)；DYY-7 C型电泳仪(北京六一仪器厂)；Life Express PCR仪(杭州四格生物有限公司)；NANO 2000型紫外分光光度计(美国Thermo公司)。

    1.2 试药

    秦皮乙素(笔者自制，含量：94.47%，平均收率：96.35%)；注射用环磷酰胺(CTX，江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：09031521，规格：0.2 g/支)；DMEM培养基(美国Sigma公司)；胎牛血清(杭州四季青生物工程有限公司)；兔抗鼠B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)单克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司)；逆转录试剂盒、PCR试剂盒(北京天根生化科技有限公司)；Bcl-2、Bax引物由上海生工生物工程有限公司设计合成；其余试剂均为国产分析纯 ......