秦怀洲，张治国，吴琳，王举磊，李立宏，高国栋#(.第四军医大学第二附属医院神经外科，西安70038；.第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室，西安 7003)

    神经母细胞瘤是神经外科临床常见而难治的原发性肿瘤，目前其治疗主要应用手术切除再辅以常规放疗或化疗，患者预后情况普遍较差[1]。研究认为，以姜黄素为主要活性成分的姜黄，具有抗炎、抗氧化、抗HIV病毒等多种作用。已有研究表明，姜黄素对鼻咽癌[2]和宫颈癌[3]等多种肿瘤具有抑制作用。但目前姜黄素对抗神经系统肿瘤的作用及其机制研究较少，其对神经母细胞瘤的作用尚未见报道。笔者拟通过观察姜黄素促进神经母细胞瘤凋亡作用，进一步了解姜黄素对肿瘤细胞侵袭能力的影响，探讨其抗神经母细胞瘤的作用机制，并为多手段治疗该肿瘤打下基础。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    BX260型荧光显微镜、CK30型倒置相差显微镜(日本Olympus公司)；Sunrise RC+TW型遥控酶标分析仪(奥地利Tecan公司)；FACSCalibur型流式细胞仪(美国BD公司)，2406-2型CO2培养箱(美国Shellab公司)。

    1.2 试药

    姜黄素、MTT、顺铂、Annexin V/PI双标试剂盒、Hoechst33258试剂盒均购自美国Sigma公司；DMEM培养基(美国Gibco公司)；小牛血清(杭州四季青生物材料工程有限公司)；其余试剂均为国产分析纯。

    1.3 细胞瘤

    人神经母细胞瘤SH-SY5 Y细胞购自中国科学院上海细胞所。

    2 方法

    2.1 MTT法测定细胞存活率

    取对数生长期的细胞，倾出其培养液，用PBS洗细胞3次，加适量的胰蛋白酶消化并细胞计数后，将细胞浓度调整至104个/mL。细胞悬液按每孔200 μL加入96孔培养板 ......