李鑫，郭雷静，陆思静(辽宁医学院附属第一医院，辽宁锦州121000)

    多重/泛耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab/PDR-Ab)的出现，给医院感染控制及临床治疗带来了极大的困难，被称为21世纪革兰阴性菌中的“耐甲氧西林金黄色葡萄球菌”。其6个主要流行克隆株在我国广泛流行，分布于北京、上海、重庆、沈阳及浙江省的多个城市[1]。整合子被认为是耐药基因在水平传播的重要因子。本研究目的在于了解我院MDR-Ab/PDR-Ab的分子流行病学及整合子是否介导了耐药基因的传播。

    1 材料与方法

    1.1 菌株来源

    我院微生物科2010年各类临床标本中培养并通过MicroScan WalkAway-40全自动微生物鉴定系统及其配套的鉴定药敏复合板鉴定为MDR-Ab/PDR-Ab的38株作为本研究重点，同一患者同一部位只统计初次分离株。

    1.2 仪器与试剂

    MicroScan WalkAway-40全自动微生物鉴定系统及其配套的鉴定药敏复合板由美国Dade公司生产；引物由北京奥科鼎盛生物科技有限公司合成；Taq DNA聚合酶、10×PCR缓冲液、DNA Marker、dNTPs、内切酶HinfⅠ和AVaⅡ、琼脂糖及凝胶回收试剂盒均购自宝生物工程(大连)有限公司(大连TaKa-Ra公司)；细菌基因组DNA提取试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司；DNA Thermal Cycler 2400为美国Perkin-Elmer公司产品。

    1.3 肠杆菌科基因间重复一致序列(ERIC-PCR)DNA检测模板的制备

    从LB培养基上挑取单个受试菌落加入5 mL LB培养基中，37 ℃、200 r·min-1震荡孵育16～20 h，取上述培养菌液2 mL，采用离心柱型细菌基因组DNA提取试剂盒提取细菌DNA作为模板 ......