石榴皮鞣质对大鼠乙醇性胃黏膜损伤的保护作用研究
对模型,1仪器与材料,2试药,3动物,2方法,1复制模型和分组,给药,2观察指标,3统计学方法,3结果,1胃黏膜溃疡指数与溃疡抑制率,2胃黏膜病理组织切片观察,3胃黏膜MDA,NO含量检测,4胃黏膜nNOS,eN
邱红梅,赖舒,尚京川,周岐新#(.重庆医科大学药学院药理教研室/重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,重庆 40006;重庆医科大学药物分析教研室,重庆 40006)石榴皮是石榴科植物石榴(Punica granatunL)的干燥果皮,其主要成分为石榴皮鞣质,占10.4%~21.3%。石榴皮性温,味涩,入肺、肾、结肠经,具有生津止渴、涩肠、止血等功效[1,2]。有研究证明,石榴皮的提取物对多种原因引起的消化系统溃疡有保护作用。石榴皮提取物可抑制大鼠幽门结扎型胃溃疡的形成[3];也对大鼠阿司匹林和乙醇诱导的实验性胃黏膜损伤和结肠炎有保护作用[4],但其作用机制尚未见报道。为此,本研究采用丙酮提取和乙酸乙酯萃取法获得石榴皮鞣质,观察其对大鼠乙醇性胃黏膜损伤的保护作用并对其作用机制进行研究。
1 仪器与材料
1.1 仪器
SZ297型自动三重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂);保温干燥箱(重庆实验设备厂);A2000S型电子分析天平(德国Sartorius公司);721型分光光度计(上海第三分析仪器厂);SN-695型智能γ-计数器(上海核福光电仪器有限公司);-70℃低温冰箱(德国Forma Scientic公司);3K30型低温离心机(德国Sigma公司);UV265紫外-可见分光光度计(日本岛津公司);BH-2型光学显微镜(日本Olympus公司);CM-2000B型生物医学图像分析系统(北京航天航空大学)。
1.2 试药
干燥石榴皮(批号:070911),购自徐州医药有限公司中药饮片厂,由重庆医科大学化学教研室尚京川教授参照丙酮提取、醋酸乙酯萃取法从石榴皮中提取鞣质,总鞣质含量为73%[5];枸橼酸铋钾(丽珠集团丽珠制药厂,批号:070906);一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)测试盒(南京建成生物工程研究所);多聚赖氨酸、兔抗一氧化氮合酶(NOS)1多克隆抗体、兔抗NOS2多克隆抗体、兔抗NOS3多克隆抗体、即用型SABC免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程公司)。
1.3 动物
清洁级SD大鼠,♀♂兼半,体重180~230g,由重庆医科大学动物实验中心提供(动物使用合格证号:SCXK(渝)20020001)。
2 方法
2.1 复制模型和分组、给药
实验分为6组,即正常(等容生理盐水)、模型(等容生理盐水)、枸橼酸铋钾(100mg·kg-1)和石榴皮鞣质高、中、低剂量(500、150、50mg·kg-1)组 ......
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