陈 晨，张洪峰，王 乐，魏亚超，李 倩

    (邯郸市中心医院药剂科，河北邯郸 056001)

    光谱法研究顺铂与溶菌酶的相互作用

    陈 晨*，张洪峰，王 乐，魏亚超，李 倩

    (邯郸市中心医院药剂科，河北邯郸 056001)

    目的：研究顺铂与溶菌酶相互作用的光谱学特征。方法：应用光谱法研究顺铂与溶菌酶的相互作用机制；计算其结合常数、结合位点数和结合距离；根据热力学参数判断作用力类型；考察二者的相互作用对溶菌酶构象的影响。结果：顺铂对溶菌酶的荧光淬灭过程为生成复合物的静态淬灭；供能体与受能体之间的距离小于7 nm，发生了非辐射能量转移；二者以氢键和范德华力结合为主；同步荧光光谱和三维荧光光谱表明结合反应影响了氨基酸残基所处的微环境。结论：顺铂能与溶菌酶结合并改变溶菌酶的构象。

    顺铂；溶菌酶；荧光光谱法；紫外-可见光谱法；荧光淬灭

    溶菌酶(Lysozyme，LYSO)是一种小分子碱性蛋白质，普遍存在于鸟类、家禽的蛋清和哺乳动物的眼泪、唾液、血液、尿液、乳汁和组织细胞中[1]，能够和许多外源和内源性物质结合，运载多种药物。顺铂(Cisplatin)为细胞周期非特异性药物，具有细胞毒性，可抑制癌细胞的脱氧核糖核酸(DNA)复制过程，并损伤其细胞膜结构，有较强的广谱抗癌作用，临床上用于治疗卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌等[2]；其副作用常常是限制该药剂量的重要因素，包括胃肠道反应、骨髓抑制、肾脏毒性和神经毒性等[3]。为了使抗癌药物能定位于肿瘤组织释放而减少对正常组织的毒副反应，选择蛋白质为药物载体的应用日益广泛[4，5]。作为生物体内重要的非特异性体液免疫因子，LYSO具有抗菌抗病毒、抗肿瘤、增强免疫力等多种药理作用[6]，与抗肿瘤药物联用，可能会增强其靶向性及抗癌疗效。笔者采用荧光光谱法和紫外-可见光谱法研究了顺铂与LYSO的相互作用，建立结合的体外模型，探讨结合的紧密程度、结合模式、结合部位等问题，所得结果将为药物的联用以及抗肿瘤药物靶向载体的选择提供有利的信息。

    1 材料

    1.1 仪器

    LS-50B型荧光光谱仪(英国珀金-埃尔默公司)；TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；PHSJ-5实验室pH计(上海精密科学仪器有限公司)；CU600电热恒温水浴箱(上海益恒实验仪器有限公司)。

    1.2 试药

    0.05 mol·L-1三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)缓冲溶液(内含0.1 mol·L-1氯化钠 ......