汪洋，汪兴生(1.马鞍山市医疗集团，安徽马鞍山243000；2.安徽中医学院药学院，合肥230038)

    hSRD5A2体外药物筛选新模型的建立及在筛选药物上的应用

    汪洋1*，汪兴生2#(1.马鞍山市医疗集团，安徽马鞍山243000；2.安徽中医学院药学院，合肥230038)

    目的：建立人类类固醇5αlphaⅡ型还原酶(hSRD5A2)体外药物筛选新模型，并用于中药提取物的筛选。方法：在体外建立hSRD5A2抑制剂模型，hSRD5A2、睾酮(T)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)一起组成了一个微量反应系统，对底物浓度、NADPH、hSRD5A2、温度和时间进行优化，并利用建立的模型筛选中药提取物。结果：当固定底物、NADPH、hSRD5A2的浓度分别为0.02μmol·L-1、0.8mmol·L-1、0.05u·mL-1时，在37℃反应60min，hSRD5A2达到了最大活性；芒果苷有显著抑制hSRD5A2活性的作用。结论：本研究建立的模型是一种简单可靠的筛选hSRD5A2抑制剂的方法；芒果苷可能成为一种治疗良性前列腺增生的药物。关键词 人类类固醇5αlphaⅡ型还原酶；良性前列腺增生；中药提取物；芒果苷；体外药物筛选模型

    良性前列腺增生(Benign Prostate Hyperplasia，BPH)是前列腺尿道周围区细胞的良性腺瘤性增生[1]，是老年男性常发病。研究表明，BPH可能是患者类固醇5αlphaⅡ型还原酶(hSRD5A2)过度表达的结果[2]。hSRD5A2作用产生的双氢睾酮(DHT)在BPH发病机制中起主要作用，而人类类固醇5α lphaⅠ型还原酶产生的DHT作用很小[3]。非那雄胺是hSRD5A2抑制剂，治疗BPH安全有效[4]。本研究拟建立一种新的hSRD5A2抑制剂模型来筛选一些中药提取物，为研究抗BPH药物奠定基础。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器

    GL21M型离心机(长沙湘智离心机仪器有限公司)；ZF-1型三用紫外分析仪(上海精科实业有限公司)；202-1A型数显电热恒温干燥箱(上海阳光实验仪器有限公司)；ZD-88B型恒温摇床(太仓市博莱特实验仪器厂)；DNP-9052型电热恒温培养箱(上海三发科学仪器有限公司)；DYY-604型稳压稳流电泳仪(南京新校园生物科技研究所)；TC-25H型PCR仪(美国Thermo Electron公司)；SW-CJ-1F型超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)；凝胶成像系统(德国UVP公司)；超声波细胞粉碎仪(上海比朗仪器有限公司)；ELx800型酶标仪(美国Bio-Tek公司) ......