周 剑，李 霞(重庆市食品药品检验所，重庆 401121)

    药品微生物限度检查法中几种样品前处理方法的可行性研究

    周 剑*，李 霞(重庆市食品药品检验所，重庆 401121)

    目的：考察药品微生物限度检查法中几种样品前处理方法的可行性。方法：采用《中国药典》中提供的非水溶性供试品的萃取法以及具抑菌活性供试品的离心沉淀法对8种标准菌株进行回收率试验。结果：8种菌株采用萃取法进行前处理后，有3种菌株回收率约为100%，另外5种菌株的回收率约为70%；采用离心沉淀法前处理后，白色念珠菌回收率均低于30%，黑曲霉回收率约为30%，其余6种菌株，当样品中不含辅料或含有可溶性辅料时，对其回收率影响不大，当样品中含有不溶性辅料时，其回收率均低于70%。结论：在药品微生物限度检查法时建议根据不同样品的抑菌活性等选择性采用相应的前处理方法。

    微生物限度检查；样品前处理方法；可行性

    微生物限度检查目前在国外越来越受到重视，每版药典收载的品种也越来越多，如《美国药典》(USP)24版收载微生物限度品种(217个)较23版(150个)增加67个。2010年版《中国药典》对微生物限度检查法也进行了一定的改动，其中对样品的前处理方法作了较为详细的规定[1]。但由于某些供试品本身具有抗菌或抑菌活性，由此可影响检验结果的准确性。而通过供试品前处理，可以去除样品的抑菌活性从而更好地对该药品的细菌、霉菌、酵母菌以及相应控制菌进行检测，避免了因采用常规方法检测控制菌或菌落数时，由于样品的抑菌特性，而难以直接检出细菌从而得出“阴性”或计数偏低的“合格”结论的情况。对供试品所进行的前处理方法，对样品本身所含微生物是否有影响，目前还没有系统的试验数据去支持，为此，笔者特采用2010年版《中国药典》中针对非水溶性供试品的萃取法以及针对具抑菌活性供试品的低速离心沉淀法[1]对8种标准菌株进行了回收率试验，从而为药品微生物限度检查法中几种样品前处理方法的应用提供依据。

    1 仪器与材料

    离心机、生化培养箱(重庆永生实验仪器有限公司)。

    十四烷酸异丙酯(批号：20091002)、淀粉(批号：20091221)、微晶纤维素(批号：20091103)、蔗糖(批号：20091028)均由国药集团化学试剂有限公司提供。

    试验菌：金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、生孢梭菌[CMCC(B)64941]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、乙型副伤寒沙门菌[CMCC(B)50094]、黑曲霉[CMCC(F)98003]均由中国食品药品检定研究院提供 ......