潘健，刘文，陈文秋，余敏灵(乐山市食品药品检验所，四川乐山614000)

    柱前衍生RP-HPLC法同时测定天花粉中天门冬氨酸与谷氨酸的含量

    潘健*，刘文，陈文秋，余敏灵#(乐山市食品药品检验所，四川乐山614000)

    目的：建立同时测定天花粉中天门冬氨酸与谷氨酸含量的方法。方法：采用柱前衍生反相高效液相色谱法。在碱性条件下，氨基酸与异硫氰酸苯酯反应，生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物。色谱柱为Venusil-AA氨基酸分析柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相A为0.05mol·L-1醋酸钠溶液(pH 6.5)、B为乙腈-水(80∶20，V/V)，梯度洗脱，检测波长为248nm。结果：天门冬氨酸与谷氨酸的进样量分别在12.16～486.40ng(r＝0.9996)与21.08～843.20ng(r＝0.9997)范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系；平均加样回收率分别为98.5%(RSD＝1.43%，n＝9)与98.8%(RSD＝1.19%，n＝9)。结论：本方法简单、准确、、重复性好，可用于天花粉中天门冬氨酸与谷氨酸的含量测定。

    柱前衍生；反相高效液相色谱法；天花粉；天门冬氨酸；谷氨酸；含量测定

    天花粉为葫芦科植物栝楼Trichosanthes kirilowii Maxim.或双边栝楼T.rosthornii Harms的干燥根，收载于2010年版《中国药典》(一部)[1]，是一种富含氨基酸的中药材[2]，其中所含的天门冬氨酸与谷氨酸在人体的氨基酸蛋白质代谢中有较重要的作用[3]。因此，测定天花粉中天门冬氨酸与谷氨酸的含量对评价其质量有一定的意义。目前尚无对天花粉中天门冬氨酸与谷氨酸含量进行同时测定的报道，故笔者采用柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对其进行了测定。

    1 仪器与试药

    2695型HPLC仪，含2487紫外检测器、Empower色谱工作站(美国Waters公司)；Cary100型紫外-可见分光光度计(美国Varian公司)；KQ5200DB型超声波提取器(昆山市超声仪器有限公司 ......