唐哲，孙玉坤，杨媛媛，何伟，张敬一(.武警辽宁省总队医院药剂科，沈阳 004；.沈阳市苏家屯区中医医院药剂科，沈阳 00；.沈阳军区总医院药剂科，沈阳 006)

    环孢素A(Cyclosporine A，CsA)为免疫抑制剂，是由11个氨基酸组成的中性环状多肽，属钙调磷酸酶抑制剂家族。有报道[1]指出，CsA在药动学、毒理学、敏感性和耐受性等方面存在着明显的个体差异，而且治疗指数较窄，引起这种差异的原因目前尚不十分清楚。临床上，监测免疫抑制剂的药物浓度，可以更好地调整药物使用剂量，以及减少药品不良反应发生。CsA的体内药物浓度和治疗效果存在相关性[2]，因此，临床上对其血药浓度监测是十分必要的。

    P糖蛋白(P-gp)是由多药耐药基因(MDR1)编码的一种产物，是一个膜蛋白，属三磷酸腺苷(ATP)结合家族。P-gp主要作用为能量依赖性地将作用底物由细胞膜内转运至细胞膜外，起跨膜渗透泵的作用。当P-gp活性增加时，底物将大量被转运至膜外，反之亦然。现有文献提示MDR1基因具有48个单核苷酸多态性(SNP)，其中，有重要的功能意义的为第26外显子C3435 T位点上的基因多态性，且不同种族间差异较大[3]。近年来，有关C3435 T基因多态性与CsA体内代谢的相关性的报道已有很多，但有关中国朝鲜族肾移植术后患者CsA谷浓度与MDR1C3435 T位点的基因多态性之间的关联性尚无报道。本文以75例肾移植术后患者(中国朝鲜族)为探讨对象，采用聚合酶链反应(PCR)扩增MDR1 C3435 T基因，利用DNA限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism，RFLP)方法检测了C3435 T的多态性，并探讨了CsA的谷浓度与MDR1 C3435 T基因位点多态性之间的相关性，希望为临床个体化用药提供依据。

    1 材料

    1.1 仪器

    ABI 2720 PCR扩增仪、紫外凝胶成像系统(Gene Company)；TDxFLx/TDx免疫分析仪(珠海健民医用科技有限公司)；Eppendorf 5804 R冷冻离心机(Gene Company)；DYY-6 C电泳仪(上海笛柏实验设备有限公司)；HH-S恒温水浴锅(郑州佳创仪器设备有限公司)；V-32涡旋混合器(上海凌初科学仪器有限公司)。

    1.2 药品与试剂

    提取基因组DNA试剂盒(广州健仑生物科技有限公司)；引物(广州健仑生物科技有限公司)；限制性内切酶MboI与Taq酶(郑州博美生物技术有限公司)；硼酸(优级纯 ......