朱亚勤，李玲，胡青，黄发珍，程亮，程丽芳，陈大为，2#(.苏州大学药学院，江苏苏州2523；2.沈阳药科大学，沈阳 006)

    多柔比星(DOX)是临床常用的广谱抗肿瘤药物，但是它的毒副作用如骨髓抑制、心脏毒性等限制了其临床应用[1]。脂质体作为一种新型给药系统，具有不良反应小、无免疫原性和可生物降解等优点。将DOX包裹入脂质体可显著降低药物毒性，改善药物抗肿瘤效果[2]。

    TAT肽是一种细胞穿膜肽[3]，其有效序列为AYGRKKRRQRRR，在生理pH下带正电荷。研究表明，TAT肽可显著提高脂质体、胶束等的细胞摄取[4]，增强化疗药物的抗肿瘤效果。然而，TAT肽无细胞选择性，直接与纳米载体相连后会降低纳米载体在体内的肿瘤靶向性。本研究将可剪切的聚乙二醇(PEG)5000连接在脂质体表面，TAT肽通过PEG2000连接隐藏在内层，构建可剪切PEG及TAT肽共修饰DOX脂质体(C-TAT-DOX-LP)，并对其进行表征。

    1 材料

    RV10旋转蒸发仪(德国IKA公司)；Nicomp TM380ZLS粒径分析仪(美国Nicomp公司)；DeBEE高压微射流纳米均质机(美国Nano DeBEE公司)；SPD-M20A高效液相色谱仪(日本岛津公司)。

    盐酸DOX(原料药，北京华奉联博科技技术有限公司，批号：HF100622，纯度：>99.5%)；二硬脂酸磷脂酰乙醇胺(DSPE，上海艾伟特医药科技有限公司，批号：100929，纯度：≥99%)；大豆卵磷脂(上海太伟药业有限公司，批号：040403，纯度：96%)；胆固醇(国药集团化学试剂有限公司，批号：F20101215，纯度：95%)；TAT-半胱氨酸(TAT-Cys，上海吉尔生化有限公司，批号：P120322-CQ289039，纯度：98%)；N-羟基丁二酰亚胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺(NHS-PEG2000-Mal，北京键凯科技有限公司，批号：ZZ112P038，纯度：95%)；N-琥珀酰-3-2-联巯基吡啶-丙酸盐(SPDP，圣克鲁斯生物技术上海有限公司，批号：A1912，纯度：95%)；甲氧基-聚乙二醇 5000-巯基(CH3O-PEG5000-SH，上海炎怡生物有限公司，批号：B120628，纯度：≥95%)；二硫苏糖醇(DTT，上海前尘生物科技有限公司，批号：233155，纯度：≥99.5%)；透析袋(分子质量：8000～14000，上海源叶生物科技有限公司)；氯仿为分析纯，乙腈、三氟乙酸为色谱纯。

    2 方法与结果 ......