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编号:187769
基于阴离子型环糊精超分子包合物高灵敏荧光光度分光法检测血浆中残留亚甲蓝Δ
http://www.100md.com 2014年12月3日 中国药房 2014年第6期
羧甲基,1材料,1仪器,2药品与试剂,2方法与结果,1溶液配制,2血浆样品的制备,3荧光分光光度法测定血浆中亚甲蓝含量,4线性关系考察,5包合反应时间,6精密度试验,7回收率试验,8实际
     周群刚,谢莲,方敏,赵铭,唐建华,王明元,徐军,谢洪平#(.苏州大学医学部药学院,江苏苏州 53;.苏州市中心血站,江苏苏州 5006)

    为降低临床上输血感染病毒的风险,增加输血的安全性,一般采用亚甲蓝光化学法灭活血浆中的病毒[1]。在灭活病毒以后,需使用特制的滤器滤除85%以上的亚甲蓝[2],最大残留量为0.2 μmol/L。为了保证用血安全,需要对血浆中亚甲蓝的残留量进行检测。测定方法有化学发光法[3]、高效液相色谱法[4]及共振瑞利散射法[5]等,这些方法中,有的灵敏度较低,有的需采用固相萃取富集后才能测定。在原卫生部编制的《血站技术操作规程(2012年版)》[6]中,利用小柱萃取富集预处理后以分光光度法检测。但是,该方法检测灵敏度仍然较低,大多数样本的吸光度在《中国药典》(2010年版)附录方法所规定的0.3以下,预示着检测结果不准确。同时,该方法不但操作繁琐,而且需要大量的血浆,浪费宝贵的血浆资源。周群刚等[7]利用电中性的β-环糊精发展了一种亚甲蓝增敏荧光分光光度法,以提高检测灵敏度,实现了不经分离、富集直接测定血浆中亚甲蓝,表现出了快速、简单、需要血浆量少的优点。但是,该方法的最低定量限(0.089 μmol/L)与血浆中最大残留量0.2 μmol/L非常接近,前者仅仅为后者的0.46倍,预示着该方法存在两个问题:(1)检测信号的绝对值较低,导致该方法对于大多数的实际检测样本的信噪比低;(2)样本的实际残留量极有可能低于该定量限,从而导致该方法不能用于有些实际样本的检测。本文利用阴离子型环糊精对亚甲蓝荧光的增敏作用,建立了一种新的检测血浆中残留亚甲蓝的方法。与之前方法相比该方法检测限低、灵敏度高、操作简便,具有一定的创新性和应用价值。

    1 材料

    1.1 仪器

    LS-55荧光分光光度计(美国Perkin Elmer公司)。

    1.2 药品与试剂

    亚甲蓝(上海TCI公司,纯度>98.5%);羧甲基-β-环糊精(山东滨州智源生物科技有限公司,纯度>98%);其他试剂均为分析纯 ......

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