罗辉燕，冯冬冬，于伟娜，丁陈波，李静，冯继红#(.重庆市第三人民医院肿瘤科，重庆 40004；.寿县中医院心内科，安徽 寿县 00；.遵义医学院附属医院肿瘤医院，贵州 遵义 5600)

    结直肠癌(Colorectal carcinoma，CRC)是常见消化系统恶性肿瘤之一。全球范围内，CRC分别位居男、女性恶性肿瘤的第三、四位，导致每年61万人死亡[1-2]。在中国，近年CRC发病率逐年上升，且发病年龄提前，每年约有40万新增病例，目前在我国消化系统恶性肿瘤中列第二位[3]。

    槲皮素是黄酮类化合物重要的一员，据研究发现，槲皮素及其衍生物可抑制多种肿瘤细胞的增殖和侵袭能力，具有较为广阔的应用前景。槲皮素具有明确的抗肿瘤作用，对乳腺癌、前列腺癌、结肠癌和肺癌等都具有预防作用和一定的治疗作用[4]。槲皮素抗肿瘤作用涉及多种机制，但对结直肠癌的作用机制尚不清楚。本研究旨在通过观察槲皮素对结直肠癌SW480细胞增殖的抑制作用及对其B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、癌基因C-myc表达的影响，探讨其抗肿瘤作用机制，为槲皮素在结直肠癌化疗中的应用提供理论依据。

    1 材料

    1.1 仪器

    CKX31型显微镜(日本Olympus公司)；CJ-2 F型超净工作台(苏州冯氏实验动物设备有限公司)；MCO175型CO2培养箱(日本Sanyo公司)；Spectra Mr型全波长酶标仪(美国Dynex公司)；聚合酶链反应(PCR)扩增仪、垂直电泳槽、凝胶成像分析仪(美国Bio-Rad公司)

    1.2 试剂

    L-15培养基(Leibovitz’s L-15 Medium，美国Gibco公司)；胎牛血清(FBS，美国Hyclone公司)；兔抗人Bcl-2单抗、兔抗人C-myc单抗(美国Epitomics公司)；兔抗人β-actin单抗(北京中衫金桥公司)；槲皮素(纯度≥98.5%)、MTT、二甲亚枫(DMSO)购自美国Sigma公司；Trizol、实时荧光定量反相(qRT)PCR(qRT-PCR)试剂盒、Premix Taq酶、Marker均购自大连宝生物工程有限公司；凯基全蛋白提取试剂盒(南京凯基生物科技有限公司)；BCA蛋白定量试剂盒、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒、聚偏二氟乙烯膜(PVDF)膜、琼脂糖(Agarose)、TAE(50×)均购自上海碧云天生物技术有限公司；ECL发光试剂盒(美国Millipore公司) ......