正交试验优选板蓝根多肽的提取工艺Δ
超纯水,法测定,1材料,1仪器,2药材,3试剂,2方法与结果,1药材的提取,2板蓝根多肽的含量测定,3正交试验优选工艺,4工艺验证试验,3讨论
南楠,刘西京,侯安国(1.深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院,广东 深圳 518055;.云南中医学院中药学院,昆明 650500)板蓝根为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥根,具有清热解毒、凉血利咽之功效[1]。长期以来,研究人员对板蓝根的药效物质基础进行了大量的研究,部分研究认为板蓝根中的游离氨基酸是有效成分[2-3]。2010年版《中国药典》(一部)也对板蓝根中游离氨基酸进行了定性鉴别[4]。笔者在研究中发现,板蓝根中多肽含量较高,经人工胃肠液消化后,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法检测发现,板蓝根多肽被降解成小分子多肽,而不是降解成游离氨基酸。整体药理试验也表明,板蓝根多肽有抗流感病毒的作用(另文发表),因此多肽可能为板蓝根的主要物质基础之一,故有必要对板蓝根多肽的提取工艺进行优化。笔者采用正交试验,以新版国家标准凯氏定氮法和2,2′-联喹啉-4,4′-二甲酸二钠盐(BCA)法测定多肽含量,考察提取溶剂、提取时间、溶剂用量对多肽提取的影响,并对这两种测定方法进行比较。
1 材料
1.1 仪器
KDN-04 A型半自动凯氏定氮仪(上海贝特仪电设备厂);Multiskan spectrum全波长酶标仪(美国Thermo公司);96孔板(美国康宁公司);MF1-A10超纯水机(美国Millipore公司);5180 R高速离心机(德国Eppendorf公司) ......
您现在查看是摘要页,全文长 5931 字符。