香菇多糖对小鼠T淋巴细胞膜上离子通道基因表达的影响
脾脏,1材料,1仪器,2药品与试剂,3动物,2方法,1分组与给药,2T淋巴细胞的提取,3qRT-PCR的测定,4统计学方法,3结果,1香菇多糖对小鼠脾脏T淋巴细胞KV1.3mRNA表达的影响,2香菇多糖对小鼠
刘国欣,邢建国,李明春,付青姐,张彬(1.石河子大学药学院,新疆 石河子 8000;.新疆维吾尔自治区药物研究所,乌鲁木齐 80000;.解放军第401医院,山东 青岛 66000)T淋巴细胞是生物体内最重要的免疫活性细胞之一,主行细胞免疫应答,并参与体液免疫应答,在人体的免疫系统功能中发挥着重要作用。T淋巴细胞膜上主要有电压门控钾离子通道(KV1.3)、Ca2+激活的钾离子通道(KCa3.1)、阳离子通道(TRPM7)、氯离子通道(Clswell)4种离子通道[1]以及钙离子通道(CRAC)激活的调控元件[基质相互作用因子(STIM)1和组成分子orai1],这些离子通道的活动与离子跨膜运动、膜电位变化以及T淋巴细胞活化、增殖密切相关。KV1.3受膜电位控制,主要维持T淋巴细胞的静息膜电位,它功能异常时,静息电位降低,可抑制Ca2+进入细胞,故它可以通过影响Ca2+浓度来影响T淋巴细胞的激活与功能,此外还参与T淋巴细胞的体积调节过程。KCa3.1受细胞内Ca2+浓度调节,细胞内Ca2+浓度升高是KCa3.1开放的主要原因,它在T淋巴细胞的活化过程中具有重要的作用[2]。T淋巴细胞上CRAC是细胞外Ca2+进入细胞的唯一通路,它通过调控细胞内Ca2+浓度来调控T淋巴细胞的活动[1]。TRPM7是一种非选择性的阳离子通道,对Ca2+、Mg2+、K+、Na+在内的众多阳离子有通透性[3],同时作为一种蛋白激酶可使自身或底物磷酸化[4]。Clswell是T淋巴细胞上的Cl-通道,正常状态下不开放,当细胞体积增大时,激活Clswell通道,Cl-由细胞内流向细胞外,直至细胞体积恢复至原来体积时Clswell通道关闭[1]。总之,T淋巴细胞膜上的离子通道作为T淋巴细胞内信号转导的一条重要途径,在T淋巴细胞的激活、分化等其他功能中具有重要作用。
香菇多糖是从担子菌伞科真菌香菇子实中提取出来的β-1,3-d-葡聚糖,从1970年Chihara第一次报道证实香菇多糖具有很强的抗肿瘤活性后,它被陆续证实具有明显的抗菌、提高机体免疫等作用[3]。香菇多糖注射液作为一种具有免疫调节作用的抗肿瘤辅助药物,广泛应用于临床,调查显示它在许多医院中药制剂的应用中排在前三位[5]。目前,对香菇多糖促进T淋巴细胞增殖与活化的机制研究相对较少,并且对T淋巴细胞的增殖与活化是否与T淋巴细胞膜上的离子通道有关的研究仍未见报道。本研究将从基因水平对香菇多糖的作用机制进行研究,主要针对香菇多糖对小鼠T淋巴细胞膜上的离子通道基因表达的影响进行探讨。
1 材料 ......
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