HPLC法同时测定人血浆中拉米夫定、齐多夫定和奈韦拉平的浓度Δ
甲硝唑,血药浓度,内标,1材料,1仪器,2药品与试剂,2方法与结果,1色谱条件,2对照品贮备液的制备,3内标贮备液,内标溶液的制备,4供试品溶液的制备,5专属性考察,6标准曲线及定量下限考察,7精
邹尚荣,李燕青,周波,简凤璧,陈谐捷(.广州市第八人民医院药剂科,广州 50060;.广州市第八人民医院感染科,广州 50060)高效抗逆转录病毒治疗(Highly active anti-retroviral therapy,HAART)是目前抗人类免疫缺陷病(HIV)治疗的最有效和最主要的措施。初治HIV感染/艾滋病(AIDS)患者治疗推荐方案为2种核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)+1种非核苷类转录酶抑制剂(NNRTIs)或2种NRTIs+1种加强型蛋白酶抑制剂(PIs)(含利托那韦)[1]。拉米夫定(Lamivudine,3TC)、齐多夫定(Zidovudine,AZT)、奈韦拉平(Nevirapine,NVP)三者合用是我国目前抗HIV治疗常用的三联用药方案之一,前两者属于NRTIs,而后者属于NNRTIs。为便于临床进行血药浓度监测和开展药动学研究,本试验以甲硝唑(Metronidazole)为内标,建立了同时测定人血浆中3TC、AZT和NVP浓度的高效液相色谱(HPLC)法。
1 材料
1.1 仪器
Agilent 1200高效液相色谱仪,包括G1314B型紫外检测器、Agilent色谱化学工作站(美国Agilent公司);XW-B型涡旋混合器(江苏康健医疗用品有限公司);AL204型电子天平(瑞士Mether Toledo公司);5417R型高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司);B320A型离心机(北京白洋医用离心机有限责任公司);DZF-6021型真空干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)。
1.2 药品与试剂
3TC对照品(中国药品生物制品检定研究院,批号:101007-200701,纯度>99.7%);AZT对照品(中国药品生物制品检定研究院,批号:100672-200401,纯度>99.5%);NVP对照品(中国药品生物制品检定研究院,批号:100641-200401,纯度>99.5%);内标:甲硝唑(安徽双鹤药业有限责任公司,批号:1209205D);乙腈、乙酸乙酯为色谱纯,水为双重蒸馏去离子水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18(150mm×4.6mm,5 μm);流动相:乙腈-水(梯度洗脱程序:0~10min为5∶95,10.1~18.8min为25∶75);流速:0.8ml/min;柱温:30 ℃;检测波长:268nm;进样量:30 μl ......
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