韦姗姗，陆雪萍，彭玲芳，屈会化，孙晔，王庆国#(1.北京中医药大学基础医学院，北京 100029；2.北京中医药大学“经典方剂的应用基础研究”创新团队，北京 100029；.云南省药物研究所，昆明 650111)

    单胺类神经递质是重要的神经信息传递物质，广泛存在于中枢神经以及外周组织内，主要包括去甲肾上腺素(Norepinephrine，NE)、肾上腺素(Epinephrine，E)、5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine，5-HT)等，目前认为精神类疾病与其关系密切[1]。市场上现有的抗抑郁药物主要是基于脑内单胺类神经递质水平过低的机制开发的[2]。因而准确测定脑组织中单胺类神经递质的含量对于抗抑郁药物的药效与机制研究具有重要的意义。目前关于脑内单胺递质的检测方法很多，其中高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)法是报道最多、应用最广的方法。现有文献中流动相主要采用等度洗脱，而NE极性较强，反相柱吸附能力较弱，因而出峰快；而5-HT极性较弱，出峰慢，若采用等度洗脱，存在NE峰分离度差或者5-HT出峰时间过长的问题。因此根据本实验室的条件，笔者建立了一种实用、灵敏、简便的HPLC-ECD梯度洗脱方法，能快速同时测定大鼠不同脑区内NE和5-HT的含量，为进一步研究单胺类神经递质奠定方法学基础。

    1 材料

    1.1 仪器

    e2695高效液相色谱仪及2465电化学检测器(美国Waters公司)；5810R高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司，离心半径:9.5 cm)；AG285电子分析天平(瑞士Mettler Toledo公司)；超纯水仪(美国Millipore公司)。

    1.2 药品与试剂

    NE标准品(哥伦比亚Matrix Scientific公司，批号:037692，供含量测定用)；5-HT标准品(批号:91M5163V，供含量测定用)和内标2，5-二羟基苯甲酸(DHBA，批号:MKBG3214V)均购自美国Sigma公司；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为高纯水。

    1.3 动物

    SD大鼠15只，♀，SPF级，体质量300～350 g，由广东省实验动物中心提供，许可证号为:SCXK(粤)2008-0002。

    2 方法与结果

    2.1 溶液的制备

    2.1.1 蛋白沉淀液 ......