邱召娟，谭喜莹，朱萱萱，朱吾元(.南京中医药大学附属医院，南京009；.南京中医药大学药学院，南京 009)

    化瘀通络方主要由葛根、当归、补骨脂、制大黄、水蛭等组成，具有活血化瘀、通络调和的作用。临床实践表明，化瘀通络方用于缺血性脑中风患者的治疗疗效确切[1]。药理实验证明，化瘀通络方能抑制脂质过氧化反应，促进自由基清除，提高脑组织自身抗氧化能力[2-3]。笔者通过观察化瘀通络方在局灶性脑缺血模型大鼠中对一氧化氮合酶(NOS)mRNA和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响，从分子生物学角度研究化瘀通络方对局灶性脑缺血模型大鼠内源性保护因子的作用，以探求该复方制剂防治急性缺血性卒中可能的作用靶点。

    1 材料

    1.1 仪器

    Biophotometer蛋白核酸测定仪(美国Eppendorf公司)；Z366型台式高速冷冻离心机(德国Hermle公司)；iCycler iQ system型实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)仪(美国Bio-Rad公司)；SDS-PAGE电泳及电转印装置(上海天能科技有限公司)；凝胶图像分析系统(德国Pharmacia公司)。

    1.2 药品与试剂

    化瘀通络方(江阴天江药业有限公司，批号：0910119，规格：10 g/袋)；脑血康胶囊(山东昊福制药有限公司，批号：20100202，规格：0.15 g/粒)；青霉素(山东鲁抗医药股份有限公司，批号：B091107，规格：80万u)；戊巴比妥钠(中国医药上海化学试剂公司，批号：F20091216)；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、NOS测试盒(南京建成生物工程研究所)；Trizol、SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain(美国 Invitrogen公司)；AMV反转录试剂盒(美国Promega公司)；引物(南京金斯瑞生物公司合成)；Taq PCR Master Mix Kit(德国Qiagen公司)。

    1.3 动物

    清洁级SD大鼠，♂，体质量280～320 g，由浙江大学实验动物中心提供[实验动物使用合格证号：SCXK(浙)2008-0033]。实验大鼠均分笼饲养，饲喂全价颗粒饲料，自由饮水，室温(22±2)℃，湿度55%～65%，光照适度，通风洁净。

    2 方法

    2.1 复制模型与分组、给药

    采用Longa法制备大鼠局灶性脑缺血模型。线栓保留2 h后 ......