王柏强，刘福，江承平，何效平，曾芝兰(.川北医学院附属医院药剂科，四川南充637000；2.川北医学院药学院，四川南充 637000)

    杜仲(Eucommia ulmoidesOliv.)是我国特有的名贵中药材，传统用药以皮为主，但剥皮后树体容易死亡。现代研究表明，杜仲叶与皮所含化学成分基本相同[1]，且叶中部分有效成分比皮还要高[2]。杜仲叶具有补肝肾、强筋骨的作用，用于治疗肝肾不足、头晕目眩、腰膝酸痛、筋骨痿软等证[3]。本研究在众多理论基础上，采用超声联合纤维素酶法提取杜仲叶绿原酸，通过正交试验确定最优提取工艺。因杜仲叶中的有效成分主要存在于细胞壁包被的叶细胞内[4]，故首先用纤维素酶水解杜仲叶细胞壁，再联合超声辅助提取法对杜仲叶绿原酸进行高效提取，最大限度地利用杜仲叶资源，为其工业化生产提供参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    10 A型高效液相色谱仪，包括SPD-10A型紫外检测器(日本岛津公司)；SHZ-DⅢ型循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂)；PHS-SB型pH计(成都瑞驰分析控制仪器有限公司)；760型CRT双光束紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)；TP-114型电子分析天平(德国赛多利斯公司)；SB-25-12DT型超声波提取器(宁波新芝生物科技股份有限公司)。

    1.2 药材

    杜仲叶，购自重庆医药公司，经川北医学院药学院李生茂讲师鉴定为真品。

    1.3 试剂

    纤维素酶(上海伯奥生物科技有限公司，活性：≥15 U/mg)；绿原酸对照品(中国食品药品检定研究院，批号：0753-200111)；其余试剂均为分析纯。

    2 方法与结果

    2.1 绿原酸含量的测定

    2.1.1 色谱条件色谱柱：Hypersic C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87，V/V)；流速：1.0 ml/min；检测波长：327 nm；柱温：室温。

    2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒质量的绿原酸对照品13 mg，置100 ml量瓶中以50%甲醇溶解并定容至刻度，即得0.13 mg/ml对照品溶液。

    2.1.3 供试品溶液的制备 准确称取杜仲叶粉末10 g ......