郑来双，马玉莲(河南省医药采购服务中心，郑州 450000)

    血管内皮细胞(Vascular endothelial cell，VEC)遍布全身，是覆盖于整个心血管系统表面的一层扁平细胞，为维持血液循环系统的健康发挥着至关重要的作用[1]。在正常情况下，VEC 与血液直接接触，处于营养充足状态。而在缺血饥饿状态下，VEC 会快速走向凋亡[2]。VEC 凋亡会直接威胁机体平衡，导致动脉粥样硬化、败血症休克等[3]。如何防治VEC凋亡，已成为近年来研究的热点[4-5]。

    萝卜硫素(Sulforaphane)是迄今为止蔬菜中发现的抗癌活性最强的一类异硫代氰酸盐[6]，并具有抗氧化功能[7]。有文献报道，萝卜硫素可以有效地抑制氧化低密度脂蛋白引起的内皮细胞损伤[8]，以及脂多糖诱导的内皮细胞的炎症反应[9]。但是，萝卜硫素对饥饿诱导VEC 凋亡的影响则少见报道。为此，笔者初步探究萝卜硫素抑制饥饿诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的作用，以期为临床应用提供参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    CO2培养箱(美国Thermo Fishier 公司)；X35型倒置显微镜(日本Olympus公司)；Elx800型酶标仪(美国Bio Tek公司)。

    1.2 药品与试剂

    M199完全培养基(美国Invitrogen公司)；重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF，珠海东大生物制药有限公司)；胎牛血清(美国Hyclone公司)；萝卜硫素、二甲亚砜(DMSO)、磺酰罗丹明B(SRB)、Hoechst 33258、吖啶橙(美国Sigma公司)；RIPA裂解液(上海碧云天生物技术有限公司)；微管相关蛋白轻链3(LC3)抗体(美国Cell signaling technology 公司)；GAPDH 抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗(美国Santa Cruz 公司)；PVDF膜、超敏化学发光底物(美国Millipore公司)。

    1.3 细胞

    HUVECs购于中国科学院上海细胞库。

    2 方法

    2.1 细胞培养与分组

    HUVECs在M199完全培养基中常规培养，完全培养基中含有10%胎牛血清、2μmol/ml的bFGF。培养条件为饱和湿度下37℃、5%CO2。HUVECs随机均分为4组，即正常对照(完全培养液)组、模型(模型培养液)组与萝卜硫素高、低浓度(10、5μmol/L)组 ......