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编号:187681
流动注射化学发光法测定人尿液中尿酸的含量Δ
http://www.100md.com 2014年3月9日 中国药房 2014年第42期
标准溶液,试剂,1材料,1仪器,2药品与试剂,2方法与结果,1溶液的配制,2试验方法,3试验条件的优化,4含量测定方法学考察,5样品分析,3讨论,1流路的选择,2混合化学发光试剂稳定时间,3AA用量的选择
     齐慧丽,盖 轲,马东平(陇东学院化学化工学院,甘肃庆阳 745000)

    在动物体内,尿酸(Uric acid,UA)是嘌呤碱的氧化产物,嘌呤代谢紊乱可以导致痛风、高尿血症、Lesch-Nyhan综合征,而肾脏损伤、白血病或肺炎患者则常会出现高尿血症,白血病患者24 h UA最大排泄量可达12 g,而正常人只有250~750 mg[1]。由此可见,进行生理体液中UA的测定,对诊断和治疗由嘌呤代谢紊乱引起的上述疾病及选择正确的药物治疗处方,具有重要的指导作用。现行的临床检验方法中,测定UA最常用的是磷钨酸还原法[2],但体液中存在的还原性物质和有色物质对比色法有干扰,同时,体液中的蛋白能与UA血浆形成共沉淀,导致有色溶液的浑浊,给检测带来困难;采用高效液相色谱法[3-5]可提高检测的选择性,但这些方法涉及昂贵的仪器或复杂的装柱过程、蛋白质的分离过程,造成了检测操作上的不便;利用酶促反应的特异性,也可以提高选择性[6-7],但酶试剂昂贵,稳定性较差,且酶分析法操作复杂;直接电化学方法具有快速、简便和灵敏度高等优点,但由于UA和抗坏血酸(AA)在人体液中同时存在,且具有类似的氧化峰电位,用裸电极检测时易受干扰。目前,许多化学修饰电极用于AA共存体系中UA的测定取得了较好的效果[8-10],但由于临床需要,仍需对简便、高灵敏度和高选择性的方法进行研究。化学发光法具有仪器简单、灵敏度高、线形范围宽的优点,但将化学发光法用于UA测定的报道并不多见[11-12]。在试验中,笔者发现,荧光素、溴化十六烷基三甲铵(CTMAB)、铜离子(Cu2+)的混合物与可以发生化学发光反应,UA则是该化学发光反应的猝灭剂。AA基于这一现象,结合流动注射技术,建立了测定人尿液中UA含量的方法,对此猝灭现象的特性进行了研究。

    1 材料

    1.1 仪器

    BPCL超微弱发光分析仪(中国科学院生物物理研究所);F-7000荧光分光光度计(日本日立公司);pHS-3C型数字酸度计(上海精密科学仪器有限公司)。

    1.2 药品与试剂

    UA标准品(美国Sigma公司,含量>99.6%,批号:050K08822);铜粉(天津市致远化学试剂有限公司);硝酸(HNO3,天津市科密欧化学试剂有限公司);氢氧化钠(NaOH,天津百世化工有限公司);CTMAB(北京奥博星生物技术责任有限公司);荧光素(上海试剂三厂);AA(成都市科龙化工试剂厂);试验所用试剂均为分析纯,水为二次蒸馏水。

    2 方法与结果 ......

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