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编号:187686
齐墩果酸对氧化损伤模型人脐静脉内皮细胞的保护作用Δ
http://www.100md.com 2014年3月9日 中国药房 2014年第43期
对模型,1材料,1仪器,2药品与试剂,3细胞,2方法,1细胞培养,2复制模型细胞ox-LDL最适质量浓度的筛选,3齐墩果酸最适浓度的筛选,4齐墩果酸对模型细胞的保护作用,5统计学方法,3结果,1复制模型细胞o
     王巧云,李丙华,朱 莉,李 萍,韩志武#(1.青岛大学药学院,山东青岛 66071;.青岛市第八人民医院药剂科,山东青岛 66100;.青岛大学附属医院药学部,山东青岛 6600)

    动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)发生于全身动脉系统,近年来其发病率日益上升[1]。Ross提出AS是一种炎症性疾病,探讨药物对内皮细胞炎症反应的影响,成为国内外AS研究的热点[2]。

    齐墩果酸(Oleanic acid)是一种从天然产物中提取的五环三萜类化合物[3]。近十年来,齐墩果酸对心血管疾病的保护作用引起了国内外学者的关注。Somova LI[4]等发现齐墩果酸具有抗AS的作用。Sultana N[5]报道了齐墩果酸的心血管保护作用,与其自身所具有不饱和基团清除活性氧、提高抗氧化酶的活性有关。但是,齐墩果酸抗AS的具体机制仍有待探索。

    血管内皮细胞的氧化损伤,尤其是低密度脂蛋白氧化修饰生成的氧化性低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)是诱发血管内皮细胞炎症反应的主要因素[6],是AS预防和治疗的关键靶点。本研究通过复制ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤模型,探讨齐墩果酸对HUVECs的保护作用,并进一步对其机制进行研究。

    1 材料

    1.1 仪器

    680型酶标仪(美国Bio-Rad公司);723型分光光度计(上海第三分析仪器厂);IX50型倒置显微镜(日本Olympus公司);TDL-50B型低速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)。

    1.2 药品与试剂

    齐墩果酸(美国Sigma公司,批号:05504,纯度:99%);人胆囊收缩素(CCK-8,日本同仁化学研究所,批号:C0038);ox-LDL(广州奕源生物科技有限公司,批号:YB-002-1);维生素E(美国Sigma公司,批号:S20796-254);过氧化氢酶(CAT)测试盒(批号:20140227)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测试盒(批号:20140220)、一氧化氮(NO)测试盒(批号:20140227)、总一氧化氮合酶(NOS)测试盒(批号:20140220)均购于南京建成生物工程研究院。

    1.3 细胞

    HUVECs(中国科学院上海细胞库)。

    2 方法

    2.1 细胞培养

    将生长状态良好的传代HUVECs加入胰蛋白酶消化1 min ......

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