黄芪多糖缓释纤维对成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响
孔板,批号,1材料,1仪器,2药品与试剂,3细胞,2方法,1缓释纤维的制备,2缓释纤维的形态观察,3缓释纤维的AP体外释放试验,4细胞在AP缓释纤维上的黏附考察,5缓释纤维对MC3T3-E1细胞增殖的影
王相峰,刘童斌,陈亚丹,付秀娟(.吉林大学第二医院,长春 3004;.吉林大学口腔医院,长春 3004)黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,AP)是黄芪中最重要的天然有效成分。随着对多糖研究的深入,发现多糖具有多方面的生物活性及功能。AP也因其在抗骨质疏松、增强机体免疫力、抗衰老、降血糖等方面有较强的活性而备受关注[1-2]。有研究报道,黄芪水提液能够促进骨形成[3],AP能促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化与矿化[4-5],适宜浓度的AP 在短期内对体外牙周膜细胞的增殖也具有一定的促进作用[6-9]。
临床上中老年患者行种植牙手术时,其骨量骨质的条件往往不理想。目前,最理想的骨修复方式是自体骨移植,但供需骨的丧失和二次手术等缺陷限制了其应用[10]。组织工程技术作为一种新的再生模式,为牙周骨缺损的修复重建提供了新思路。左旋聚乳酸(PLLA)是一种可降解生物高分子材料,具有机械性能良好、可降解等特点,被广泛应用于医疗行业;电纺丝作为一种新兴的技术手段,操作简易,可制备包裹有效药物成分的可控、缓释药物的复合材料。乳液法电纺丝技术是基于高压静电纺丝发展而来,将药物加入静电纺丝纤维中,药物分散均匀,缓释效果较好,且具备经济实惠、制备方法简单的优势。因此,本研究将AP 与PLLA 结合制成AP 缓释纤维,通过考察AP 缓释纤维的体外释放以及其对成骨细胞MC3T3-E1的黏附、增殖和分化的影响,初步探讨AP缓释纤维用于种植体周骨缺损修复的可行性。
1 材料
1.1 仪器
静电纺丝推进装置(北京铠为信科技有限公司);超纯水仪(美国Millipore 公司);HZQ-X100 型恒温震荡培养箱(哈尔滨东联电子技术开发有限公司);Micrion FEI PHILIPS场发射扫描电子显微镜(美国FEI公司);TU-1810紫外-可见分光光度计(上海仪电分析仪器有限公司);TGL-16G-A离心机(上海安亭公司,离心半径:3.5 cm);MCO-18AIC(UV)型CO2培养箱(日本三洋电机株式会社);倒置荧光显微镜(日本Olympus公司);恒温水浴箱(上海医疗器械五厂)。
1.2 药品与试剂
PLLA(上海丽昂化学有限公司,批号:320140124,纯度:>95%);AP(南京景竹生物科技有限公司,批号:20131022,纯度:90%);胰酶(宝泰克生物有限公司,批号:20140411,分析纯);高糖达尔伯克改良伊格尔(DMEM)培养基(美国Gibco 公司 ......
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