阎 婷，李 娜，贾景明，胡高升#(.沈阳药科大学中药学院，沈阳 006；2.辽宁医学院药学院，辽宁 锦州 200)

    鱼鳔又称鱼白、鱼胶和鱼肚，为石首鱼科黄鱼属动物大黄鱼[Pseudosciaena crocea(Richardson)]、小黄鱼(P.polyactisBleeker)或鲟科鲟鱼属动物中华鲟(Acipenser sinensisGray)和鳇属动物鳇鱼[Huso dauricus(Georgi)]等的鱼鳔[1]。鱼鳔作为贵重动物药材，不仅是筵席名菜，亦有很好的滋补作用和药用价值，如滋阴养血、止血补血和补肾益精等[2-3]。由于鱼鳔商品来源复杂，市场上混淆品较多，仅仅根据形态特征来进行鉴别鱼鳔真伪已不能满足市场需求[4]。随着分子标记技术的发展，运用DNA分子遗传标记技术鉴别中药材的真伪已被广泛认可[5-7]。为了建立鱼鳔药材准确鉴别方法，本研究采用高特异性聚合酶链反应(PCR)技术对鱼鳔药材及其混淆品进行了DNA分子遗传标记鉴别。采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取8种供试品鱼鳔的DNA，并对其线粒体12S rRNA 基因进行特异性扩增，为经济适用、准确便捷和高稳定性地鉴别鱼鳔种属来源提供依据，同时有利于鱼鳔药材的质量控制。

    1 材料

    1.1 仪器

    Hema 9600型梯度基因扩增仪、TGL-16R/18R型冷冻高速冷冻离心机(珠海黑马医学仪器有限公司)；HE-120 型多功能水平电泳槽、EPS300型电泳仪(上海天能科技有限公司)。

    1.2 药材

    大、小黄鱼鱼鳔来源于市场购买的大黄鱼、小黄鱼、混淆品鱼鳔来源于市场购买的青鱼、鲅鱼、鲤鱼、草鱼、鲢鱼和鲫鱼，正品、混淆品均经沈阳药科大学中药学院贾景明教授鉴定为真品。

    1.3 试剂

    PCR 试剂盒、DNA MarkerⅢ均购自北京康为世纪生物科技有限公司；琼脂糖(香港基因有限公司)；溴化乙锭(上海生工生物科技有限公司)；所用引物订购于生工生物工程(上海)有限公司。

    2 方法

    2.1 大、小黄鱼鱼鳔高特异性PCR鉴别引物的设计 ......