李相成，刘小红，高 华，范美玲，刘 坤，王 威(青岛大学医学院，山东青岛 266021)

    高尿酸血症是嘌呤代谢紊乱或(和)尿酸排泄减少所引起的一组异质性疾病，是引发痛风的重要生化基础[1]。近年研究表明，高尿酸血症与心血管疾病、慢性肾脏病及代谢综合征，如糖尿病、肥胖等密切相关，是一种严重影响公共健康的疾病[2-4]。黄嘌呤氧化酶能催化黄嘌呤和次黄嘌呤的氧化生成尿酸，尿酸浓度过高会导致高尿酸血症。黄嘌呤氧化酶作为尿酸生成的关键酶是降低尿酸药物的作用靶点[5]。别嘌呤醇是在临床上使用的黄嘌呤氧化酶抑制剂，但有皮肤过敏、肝炎、超敏反应综合征等不良反应，在一定程度上限制了其使用[6-8]。2008 年欧盟药监局和2009 年美国FDA 批准上市的治疗高尿酸血症和痛风的新药非布索坦(Febuxostat)，是一种非嘌呤类黄嘌呤氧化酶抑制剂，其药效优于别嘌呤醇[9]，但最常见的副作用为肝功能异常、恶心、皮疹、关节痛等[10]。筛选抑制黄嘌呤氧化酶作用植物资源，系统研究其物质基础和作用机制，有望研制出高效、低毒、成分清楚、作用机制明确的组合物或先导化合物。

    虎杖(Polygonum cuspidatumSielb.et Zucc.)为蓼科虎杖属植物，其根茎和根入药，具有利湿退黄、清热解毒、散瘀止痛、止咳化痰的功能，临床主要用于治疗高脂血症、肝炎、关节疾病等[11]。已有文献报道虎杖提取物可降低高尿酸血症模型动物血尿酸水平和抑制黄嘌呤氧化酶活性，可改善痛风性关节炎的病理改变[12]，但缺乏虎杖提取物对黄嘌呤氧化酶抑制活性物质基础和作用机制的系统深入的研究。笔者采用高效液相色谱(HPLC)法测定黄嘌呤氧化酶-黄嘌呤反应体系尿酸生成量，体外测定不同分离部位抑制作用，并进一步进行有效部位酶动力学抑制机制的探讨，以为虎杖治疗痛风新药开发和抑制黄嘌呤氧化酶作用有效成分研究提供依据。

    1 材料

    1.1 仪器

    1260 型高效液相色谱仪(美国Agilent 公司)；BT 125D 型电子天平(德国Sartorius 公司)；HH420-2B 型精密恒温水浴锅(上海比朗仪器有限公司)；S25 型微型漩涡混合仪(德国IKA公司)。

    1.2 药材

    虎杖药材购于安徽省亳州市永刚饮片有限公司(批号：121221)，经大连大学冯宝民教授鉴定为真品。标本存放于青岛大学药学院，样品编号：QY-2012-PC-01。

    1.3 试剂 ......