刘 栋，汤长明(解放军第153中心医院药械科，郑州 450042)

    依诺沙星为第三代喹诺酮类药物，在临床上广泛用于敏感菌所致的咽喉、支气管、肺、尿路、前列腺等部位感染[1]。由于葡萄糖酸依诺沙星注射液抑菌活性较强，去除其抑菌活性成为无菌检查的关键步骤。笔者严格按照2010年版《中国药典》(二部)附录ⅪH“无菌检查法”中的原则性要求进行试验[2]，采用增加冲洗液量和在培养基中加入能与喹诺酮类药物发生络合反应的中和剂(Mg2+或Mn2+)的方法去除供试品的抑菌活性[2-11]，并分别进行了验证，从而建立一种适用于葡萄糖酸依诺沙星注射液的无菌检查方法。

    1 材料

    1.1 仪器

    HTY-2000A型智能集菌仪，配有全封闭集菌培养器(孔径为0.22 μm)(杭州泰林生物技术设备有限公司)；隔水式恒温培养箱、百级净化工作台、高压蒸汽灭菌器等。

    1.2 药品

    葡萄糖酸依诺沙星注射液(某院自制制剂，批号：1312171、1312172、1312173，规格：100 ml∶0.2 g)。

    1.3 培养基及试剂

    硫乙醇酸盐流体培养基(批号：20131102)、改良马丁培养基(批号：20130808)、营养肉汤培养基(批号：20130105)、营养琼脂培养基(批号：20130428)、改良马丁琼脂培养基(批号：20130612)、蛋白胨(批号：20130108)均由北京奥博星生物技术有限责任公司生产；氯化镁(天津市瑞金特化学品有限公司，批号：20121016)、硫酸锰(天津市化学试剂三厂，批号：20090208)均为分析纯。

    含Mg2+培养基：细菌、真菌培养基配制过程中加入氯化镁，使其终浓度为0.2 mol/L。含Mn2+培养基：细菌、真菌培养基配制过程中加入0.2 mol/L的硫酸锰溶液，加入量为5%。

    所有培养基、冲洗液(0.1%蛋白胨水溶液)均按照2010年版《中国药典》(二部)附录ⅪH“无菌检查法”项下要求配制及灭菌，培养基的无菌性和灵敏度检查也均符合要求。

    1.4 菌种

    金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、生孢梭菌[CMCC(B)64941]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]均由中国食品药品检定研究院提供 ......