盛阳昊，王 萍，刘丹琦，颜晓敏，周伯庭#(1.中南大学湘雅医院药学部，长沙 410008；2.中南大学药学院，长沙 410013；3.株洲市恺德医院药学部，湖南株洲 412000)

    20世纪70年代，Huber JFK等[1]开发了柱切换(Columnswitching)技术。首先在一级色谱柱完成被测组分与复杂基质的初分离，并通过阀切换来改变流动相的流向和组成，使目标组分从一级柱流向二级柱，并在二级柱上进行被测组分的测定，从而完成复杂样品的分析。随着近几十年的发展，柱切换技术在21世纪初已基本完善，被广泛应用于分析化学的各个领域，如环境分析、食品检验、体内药物分析、制剂分析等。其中，在临床药物分析和药动学中的应用最为广泛，因为通过柱切换技术可实现复杂生物基质经简单处理即可进样或直接进样，自动化操作减少了前处理过程中出错的可能，提高了整个分析过程的准确性，缩短了时间，使复杂生物基质中小分子药物分析变得简便快捷。虽然柱切换技术已基本成熟，但是还没有相应的商品上市，这需要依靠实验室的搭建，因此柱切换技术在我国医院药学部门的应用并不普及，国内关于日常治疗药物检测和药动学的相关文献报道也不多。柱切换高效液相色谱(HPLC)平台搭建的关键是如何构建切换阀与色谱柱构成的色谱网络，并根据医院的具体情况选用合适的传输技术。为此，笔者以“Column switching”“柱切换”等为关键词，检索Elsevier、Springer、中国知网等数据库，通过文献分析临床药物柱切换平台搭建的现状与研究进展，同时总结应用不同的传输技术和色谱柱来构建色谱网络的方法，为医院药学部门搭建HPLC柱切换平台、简化复杂样品的处理过程提供参考。

    1 HPLC柱切换平台的仪器组成和搭建

    HPLC柱切换平台主要由进样阀、切换阀、高压泵、色谱柱、检测器和控制、处理系统构成，可由普通HPLC加上若干切换阀和色谱柱等部件构成。下面具体分析色谱网络的搭建过程。

    1.1 一级色谱柱的选择

    复杂生物基质如血浆、血清等，其富含蛋白质，且被测药物浓度往往较低，经过蛋白沉淀、液液萃取、离线的固相萃取后，一般需要挥干浓缩、复溶等一系列样品前处理步骤。这些步骤不但耗时，而且存在操作复杂、精确性差等缺点。而柱切换平台的第一级柱将直接实现生物基质中的大分子与待测组分的分离，富集和净化待测组分。一级色谱柱的选择主要根据去蛋白的形式和药物性质来决定。

    1.1.1 离线去蛋白 离线去蛋白一般采用强酸或有机溶剂，将涡旋离心后的上清液直接大体积进样 ......