微流控芯片非接触电导法测定僵蚕中草酸铵的含量Δ
缓冲溶液,1材料,2方法与结果,1试验条件,2溶液的制备,3缓冲溶液种类,4线性关系考察和检测限,5精密度试验,6稳定性试验,7重复性试验,8加样回收率试验,9样品含量测定,3讨论,1缓冲溶液,2添加剂,3进样时
杨秀娟,陈缵光,陈倩瑜(1.南方医科大学珠江医院,广州 51080;.中山大学药学院,广州 510006;.佛山市顺德区北滘医院,广东佛山 5811)僵蚕来源于蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx moriLinnaeus 4~5龄的幼虫感染(或人工接种)白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体,具有催眠、抗惊厥、息风止痉、清热解毒、祛风化痰及散结等功效[1]。而相关研究表明,僵蚕抗惊厥作用的主要有效成分是其体表白色粉末中含有的草酸铵[2]。不同的产地、不同的炮制方法以及白僵菌的繁殖条件都会影响僵蚕中草酸铵的含量[3]。目前,有关文献报道的关于僵蚕中草酸铵含量测定的方法主要有高效液相色谱法[4-5]、高效毛细管电泳法[6]、示波电位滴定法[7]、高锰酸钾氧化还原滴定法[8]等。高效液相色谱法的应用范围广、分离效率高、定量效果好,为目前最为常用的分析方法,但其流动相消耗大,且多为有毒的有机溶剂,对操作者和环境有一定的危害,另分析成本相对较高。而高效毛细管电泳法虽然需样量少、灵敏度高,但是毛细管容易损坏。示波电位滴定法是将高锰酸钾法与示波器结合起来指示终点的方法,该方法比高锰酸钾氧化还原滴定法更为直观灵敏、简便快速,但是滴定结果专属性差,准确性易受温度、酸度、滴定速度的影响。使用微流控芯片非接触电导检测的方法目前尚未见报道。
笔者建立了采用微流控芯片非接触电导法测定僵蚕中草酸铵的含量。该方法仪器集成程度高、操作简单,使用具有强分离效能的微流控芯片进行分离,而所用的非接触式电导检测避免了电极与溶液接触,寿命长,成本低,灵敏度较高,为僵蚕的质量控制提供一种高效、准确的分析方法。
1 材料
PMMA(Polymethyl methacrylate,聚甲基丙烯酸甲酯)十字通道芯片(微通道上宽30 μm,下宽100 μm,深30 μm,进样通道为十字结构,分离通道长44 mm,有效分离长度43 mm。大连理工大学微系统研究中心提供);非接触电导检测器(两电极间的距离0.6 mm。中山大学药学院提供)[9];微型压电陶瓷高压电源(中山大学药学院提供)[10];SHZ-D(Ⅰ)型循环水式真空泵(巩仪市英峪予华仪器厂);色谱工作站(中山大学医药仪器与应用研究所),数据记录与处理在普通P4微机上完成。
僵蚕(购自北京同仁堂广州药业连锁有限公司,产地:四川,批号:20140702、20140703、20140704),经中山大学姚美村副教授鉴定为蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx moriLinnaeus 4~5龄的幼虫感染白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体;草酸铵对照品(广州化学试剂厂 ......
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