赵丽颖，宋殿荣(1.天津中医药大学研究生院，天津 300193；2.天津中医药大学第二附属医院妇科，天津 300150)

    双黄连冻干粉由金银花、黄芩、连翘三味药材提取精炼而成，具有清热解毒、疏风解表之功效，是目前临床治疗呼吸道感染性疾病的首选药物之一[1]，也可被用于妊娠期多种感染性疾病的治疗[2]。宋殿荣等[3-4]对双黄连冻干粉透过不同孕期妊娠大鼠胎盘屏障的药物成分进行了分析，然而，由于种属差异，动物实验结果难以直接外推到人类。2013年宋殿荣等[5]又利用胎盘组织薄片培养技术与尤斯扩散池(Ussing chamber)相结合建立了人胎盘屏障体外模型，该模型具备在体胎盘的内分泌和物质转运功能，能有效避免种属差异，模拟在体环境。而应用该技术的关键是建立胎盘灌流液中中药成分的分析方法。为此，在本研究中笔者建立了采用高效液相色谱(HPLC)法测定胎盘灌流液中双黄连冻干粉中8种成分含量的方法，为中药透过胎盘屏障药物成分研究提供分析方法学借鉴。

    1 材料

    1260 型HPLC 仪，包括四元泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱和二极管阵列检测器(美国Agilent 公司)等；数控系列超声处理器FS-150N(上海生析超声仪器有限公司)。

    双黄连冻干粉(哈药集团中药二厂，批号：Z10960058，规格：600 mg/支)；绿原酸(批号：110753)、连翘酯苷B(批号：111811)、连翘酯苷A(批号：111810)、黄芩苷(批号：110715)、连翘苷(批号：110821)、木犀草素(批号：111520)、汉黄芩苷(批号：P0641)、黄芩素(批号：111595)、葛根素(批号：110752)等对照品均购自中国食品药品检定研究院(纯度均>98%)；甲醇(美国Fisher 试剂公司)、乙腈(美国Fisher 试剂公司)、甲酸(美国ROE试剂公司)均为色谱法，水为超纯水。

    2 方法与结果

    2.1 溶液的制备

    2.1.1 混合对照品溶液 精密称取绿原酸、连翘酯苷B、连翘酯苷A、黄芩苷、连翘苷、木犀草素、汉黄芩苷、黄芩素对照品各适量，加入乙腈溶解并定容至同一10 ml棕色量瓶中，摇匀，配成混合对照品溶液，于4 ℃保存，备用。

    2.1.2 内标溶液 精密称取内标物葛根素10 mg，置于10 ml量瓶中，加入乙腈稀释至刻度 ......