HPLC 指纹图谱结合共有模式识别评价重庆市售青蒿饮片质量的一致性Δ
青蒿素,1材料,2方法与结果,1色谱条件,2溶液的制备,3方法学考察,4数据分析方法6-7,5样品测定,6相似度计算,7主成分分析和聚类分析,8青蒿标准HPLC指纹图谱的建立,3讨论,1提取
贾成友,赵凤平,李 微,陈 娇,杨荣平,#,王云红(.成都中医药大学药学院,成都 637;.重庆市中药研究院,重庆 400065)青蒿(Artemisia apiacea)系菊科植物黄花蒿(Artemisia annuaL.)的干燥地上部分,具有清热、解暑、除蒸、截疟的功效,主治暑热、暑湿、湿温、阴虚发热、疟疾、黄疸等证[1]。现代药理研究表明,青蒿在抗疟、抗肿瘤、抗菌杀虫、抑制免疫功能亢进、抗心律失常、抗孕、抗单纯疱疹病毒等方面作用明显,同时可用于红斑狼疮的治疗及降低机体本身对类风湿性关节炎的过度免疫[2-3]。从青蒿中提取分离出的青蒿素,具有抗疟、抗菌、抗肿瘤、解热、增强免疫等药理活性,尤其适宜于恶性疟疾、脑型疟疾的治疗,是世界卫生组织推荐的治疗疟疾的首选药物[4-5]。目前,国内有关青蒿质量评价的研究多以青蒿素、青蒿酸等指标性成分为主。本研究采用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱对不同批次的青蒿的相似度进行评价,并采用主成分分析、聚类分析相结合的方法对指纹图谱进行共有模式识别,探讨饮片质量的差异性,以为客观评价青蒿饮片质量提供参考。
1 材料
20A系列HPLC仪,配有二元泵、在线脱气、二极管阵列检测器、自动进样器、柱温箱(日本岛津公司);AUW-220 型万分之一电子天平(日本岛津公司);CPA225D 型十万分之一电子天平[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司];SY2000 型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SB-5200DT超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司,功率:300 W,频率:50 kHz)。
东莨菪内酯、青蒿素对照品(中国食品药品检定研究院,批号:110768-200504、100202-201004);青蒿酸对照品(四川生物试剂有限公司,批号:120628);甲醇(安徽时联特种溶剂股份有限公司,色谱纯),磷酸(重庆申渝化学试剂厂,分析纯),95%乙醇[重庆川东化工(集团)有限公司,分析纯],水为自制超纯水。
青蒿饮片(批次:S1~S12)购自重庆市各大药店,经重庆市中药研究院李隆云研究员鉴定为菊科植物黄花蒿A.annuaL.的干燥地上部分。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Waters XTerra C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A 为甲醇,流动相B 为0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱(洗脱程序见表1);流速:1.0 ml/min;检测波长:220 nm;柱温:30 ℃;进样量:10 μl ......
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