张亚茹，罗李王，杨最素，赵玉勤，余方苗，王 飞，丁国芳(浙江海洋学院食品与医药学院/浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心，浙江舟山 316022)

    海葵(Sea anemone)又称海菊花，是腔肠动物门珊瑚虫纲海葵目的一种较原始的动物，共有6科37种，广泛分布于温热带海域，主要吸附在岩石或沉积物中[1]。其具有滋阴壮阳、收敛止泻、祛湿杀虫等多种作用[2]，早在20世纪70年代就有学者对其进行研究。海葵触手内含有的可溶性细胞蛋白和多肽类化合物，具有神经和细胞毒性[3]。且研究还发现海葵中具有抗肿瘤活性物质，对肿瘤细胞具有杀伤和诱导凋亡的作用[4-6]。舟山黄海葵(Anthopleura xanthograrnmica，下称“黄海葵”)属于海葵科侧花海葵属。据已有研究报道，其体内和触手中含有强心作用的兴奋性肽类毒素和强杀虫活性的多肽，是海洋抗肿瘤药物研发的理想对象[7-8]。

    近年来，肺癌的发病率及病死率呈快速增长，患者就诊时往往已是晚期，失去了手术机会，而化疗的毒副作用会影响患者治疗效果和生活质量。从海洋生物中提取低毒高效的抗肿瘤活性物质是抗肿瘤药物研究的热点之一，但有关黄海葵抗肿瘤作用的研究尚未见报道。故笔者通过对黄海葵进行反复冻融、丙酮分级沉淀等方法提取得到黄海葵粗提物，并作用于人肺癌SPC-A1细胞，研究其体外抗SPC-A1细胞的活性，以期为黄海葵的抗肿瘤生物活性研究提供实验依据。

    1 材料

    1.1 仪器

    CF16RX Ⅱ型高速冷冻离心机(日本Hitachi 公司)；ZHJH-C12090 型超净工作台(上海智城分析仪器制造有限公司)；680型酶标仪(美国Bio-Rad公司)；CKX4型倒置显微镜、BX41 型荧光显微镜、CCD-NC6051 型显微摄像系统(日本Olympus公司)。

    1.2 药品与试剂

    胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司，批号：140809)；1640培养基(美国Gibco公司，批号：1256837)；青霉素(华北制药股份有限公司，批号：F4056201，效价：80 万u/0.48 g)；链霉素(山东鲁抗医药股份有限公司，批号：140816，效价：100 万u/g)；胰蛋白酶(美国Sigma 公司，批号：1G003907，效价：42 362 U/g)；MTT(美国Sigma公司，批号BS0328，纯度>98%)；吖啶橙(AO，批号：75168-11-5，纯度：≥95%)、溴化乙锭(EB，批号：1239-45-8 ......