桑白皮有效成分分离纯化的工艺研究Δ
大孔,生物碱,1材料,1仪器,2药品与试剂,2方法与结果,1总多糖,总黄酮,总生物碱的含量测定,2桑白皮提取物的制备,3含量测定方法学考察,4总黄酮的分离纯化,5总多糖的分离纯化,6总生物碱的分离纯化,7验证试验,3讨论
董德刚,张秀英,刘小雪(1.大连医科大学第二附属医院,辽宁大连 11607;.辽宁中医药大学研究生学院,沈阳 110847)桑白皮为桑科落叶灌木或小乔木植物桑Morus albaL.的干燥根皮,含有黄酮类、生物碱类、多糖类等多种物质,具有泻肺平喘、利水消肿的功效[1]。药理研究显示,桑白皮总黄酮具有降低血糖血脂[2]、抗病毒[3]等作用;桑白皮提取物(桑黄酮含量>30%)对实验性糖尿病模型大鼠坐骨神经损伤有一定的改善作用[4];桑白皮多糖对四氯化碳、对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤均有明显的保护作用[5];且桑白皮总黄酮、总多糖及总生物碱各部位均具有一定的降糖作用[6]。笔者拟根据桑白皮总黄酮、总多糖、总生物碱不同有效成分的性质,优选桑白皮有效部位的分离纯化工艺,为有效提取桑白皮有效成分提供参考。
1 材料
1.1 仪器
HH-S恒温水浴锅(金坛市亿通电子有限公司);KYC-1102恒温摇床(上海福玛实验设备有限公司);UV-1750紫外分光光度计(日本岛津公司)。
1.2 药品与试剂
芦丁对照品(四川省维克奇生物科技有限公司,批号:130824,纯度:≥98%);葡萄糖对照品(四川省维克奇生物科技有限公司,批号:130407,纯度:≥98%);4-羟基哌啶(阿拉丁试剂有限公司,批号:41944,纯度:98%);D101大孔吸附树脂、HPD400 大孔吸附树脂、AB-8 大孔吸附树脂、001×7 阳离子交换树脂均购自沧州宝恩吸附材料科技有限公司;桑白皮饮片(辽宁中医药大学附属第一医院,批号:20140110);其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 总多糖、总黄酮、总生物碱的含量测定
2.1.1 总多糖含量测定 采用苯酚-硫酸法[7]。称取葡萄糖对照品6.19 mg,置于50 ml 量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释至刻度,超声振荡得0.123 8 mg/ml 的葡萄糖对照品贮备液。分别量取上述贮备液0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 ml于具塞试管中,用蒸馏水定容至2.0 ml,再加入1.0 ml 6%苯酚溶液及5.0 ml 98%浓硫酸,盖塞,静置10 min,摇匀,再放置20 min,用分光光度计于490 nm波长处测定吸光度(A)。以质量浓度(c)为横坐标、A为纵坐标进行线性回归,得回归方程为A=7.828 3c-0.025 3(r=0.999 1)。结果显示 ......
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