星点设计-效应面法优化重楼皂苷类成分的提取工艺Δ
1材料,1仪器,2药材,药品与试剂,2方法与结果,1重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ和重楼总皂苷的含量测定,2单因素试验,3星点设计-效应面法优选重楼皂苷提取工艺,3讨论
鞠建峰,朱宗敏,杜忠科(山东中医药大学附属医院药剂科,济南 250014)重楼为百合科植物云南重楼Paris polyphyllaSmithvar.yunnanensis或七叶一枝花Paris polyphylla var.chinensis的干燥根茎,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊等功效,临床主要用于疔疮痈肿、咽喉肿痛、跌扑伤痛、惊风抽搐[1]。现代研究表明,重楼具有止血、抗肿瘤、抗菌、抗炎等作用[2-3],其主要活性成分为甾体皂苷类成分[4]。
目前对重楼皂苷类成分的提取工艺主要是采用正交试验设计法进行工艺参数优选,但正交试验设计法试验精度不够,建立的数学模型预测性较差[5]。故本研究采用试验精密度较高、预测值更接近真实值的星点设计-效应面法优选重楼总皂苷的提取工艺,以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ及重楼总皂苷的提取率为考察指标,在单因素试验的基础上,优化重楼皂苷的提取工艺参数,为重楼药材的深入研究提供参考。
1 材料
1.1 仪器
1260 型高效液相色谱(HPLC)仪(美国安捷伦公司);TG-16型离心机(上海安亭科学仪器厂);AB135-S型电子天平(瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司);UV2600型紫外-可见分光光度计(日本岛津公司)。
1.2 药材、药品与试剂
重楼皂苷Ⅰ对照品(批号:111590-201103,纯度:92.1%)、重楼皂苷Ⅱ对照品(批号:111591-201103,纯度:93.4%),均购自中国食品药品检定研究院;重楼药材(山东中医药大学附属医院,经山东中医药大学药学院生药系李峰教授鉴定为云南重楼Paris polyphyllaSmithvar.yunnanensis干燥根茎);乙腈为色谱纯,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ和重楼总皂苷的含量测定
2.1.1 重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ的含量测定[6-7]采用HPLC法。色谱条件:色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-水(48∶52),流速为1.0 ml/min;检测波长为203 nm;柱温为40 ℃;进样量为10 μl ......
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