高 瑛，赵淑慧，陆 洋，温 然(1.北京中医医院顺义医院，北京 101300；.北京中医药大学中药学院，北京 10010)

    骨愈搽剂处方来源于北京中医医院顺义医院骨外科治疗骨性关节炎应用多年的临床经验方，由透骨草、鸡血藤、艾叶、红花等6味中药组成，具有祛风除湿、活血通络的功效，将其制成搽剂后可具有使用携带方便、有效成分含量高且可控、患者依从性好等特点，更加适合现代社会广泛应用。该处方中有效成分以总黄酮为主，其含量最高，单体成分以羟基红花黄色素A(HSYA)最明确，故本研究以总黄酮、HSYA 为指标，考察骨愈搽剂的体外透皮情况，并比较两指标成分体外透皮行为的相关性，为骨愈搽剂的研制开发提供数据支持。根据2010年版《中国药典》(一部)[1]及处方药味透骨草、红花、鸡血藤[2-4]等相关文献报道，总黄酮的含量以芦丁为对照品，采用紫外-可见分光光度法测定，HSYA 的含量采用高效液相色谱法进行测定。

    1 材料

    1.1 仪器

    Agilent 1200 高效液相色谱仪(美国Agilent 公司)；TU-1810 紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；BS 110S 电子分析天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司)；YB-P6 智能透皮试验仪(天津药典标准仪器厂)；KQ5200DA超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

    1.2 药品与试剂

    骨愈搽剂[北京中医医院顺义医院自制，批号：20120830，规格：1 g(生药)/ml]；芦丁对照品(批号：100080-200707，纯度：90.5%，供紫外含量测定用)、HSYA 对照品(批号：111637-201106，纯度：98%)均购自中国食品药品检定研究院；甲醇、乙腈、磷酸为色谱纯，乙醇等其他试剂均为分析纯。

    1.3 动物

    2 方法与结果

    2.1 小鼠皮肤的处理[5]

    将小鼠断颈处死，取适量脱毛膏均匀涂于小鼠腹部脱去鼠毛，取下腹皮，用干棉花将脂肪及黏液组织擦试干净，用清水和生理盐水反复冲洗后，包于铝箔纸内，于冰箱冷冻保存备用。实验前自然解冻，目测皮肤完整性，不得有任何破损。

    2.2 总黄酮的含量测定

    2.2.1 测定方法 将体外透皮试验取出的4 ml接收液置于10 ml量瓶中 ......