Q-TOF LC/MS技术分析乙醇体积分数对人参单体皂苷提取率的影响Δ
总皂苷,提取液,1材料,1仪器,2药品与试剂,2方法与结果,1供试品溶液制备,2总皂苷的测定,3皂苷单体的检测条件10,4MS2法确定各物质的峰归属,3讨论
杨宗林,李 慧,王 冰,刘淑莹,2#(.吉林省人参科学研究院/长春中医药大学,长春 307;2.中国科学院长春应用化学研究所,长春 30022)人参是五加科(Araliaceae)植物人参(Panax ginseng C.A.Meyer.)的干燥根,具有大补元气的功效[1],临床上常用于各种虚证的治疗[2]。人参中的主要有效成分是皂苷,其常以人参类植物为主要原料经不同体积分数的乙醇(甲醇)煎煮或浸泡后获得。人参皂苷是一类四环三萜化合物,在甾体母核上连接糖基侧链而得,提取溶剂极性的差异对皂苷的提取率影响较大。
研究[3-5]表明,溶剂不同时,相同提取工艺所得皂苷含量存在差异:诸多研究均以总皂苷为指标,且研究结果各不相同,由于皂苷单体性质各不相同,不同乙醇体积分数提取所得到的皂苷单体含量理论上也应存在一定的差异。但却未见乙醇体积分数对皂苷单体提取率差异的相关文献报道。
高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)技术可以对复杂体系进行定性定量分析[6-7],近年来在天然药物中的应用越来越普遍[8]。四极杆-飞行时间MS(Q-TOF MS)技术具有分辨率高、稳定性好、精密度高的优点,在化合物定性分析方面应用较广。本文采用Q-TOF液相色谱(LC)/MS技术鉴定了不同体积分数乙醇所得提取物中主要的人参皂苷单体,并对其含量进行比较,研究了乙醇体积分数对皂苷提取率的影响。
1 材料
1.1 仪器
1200型液相色谱系统、6520 Accurate Q-TOF仪(美国Agilent公司);Sigma-Aldrich C18色谱柱(美国Sigma公司);TU-1810型紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)。
1.2 药品与试剂
四年生全须生晒参(吉林省紫鑫药业有限公司,批号:131120,经长春中医药大学姜大成教授鉴定为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Meyer);人参皂苷Re 对照品(以下简称Re,南京泽朗医药科技有限公司,批号:20130770,纯度:>98%);甲醇、乙腈为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液制备
将生晒参粉碎成60目粗粉,每份约15 g,料液比设为1∶10(g/ml),分别采用水和20%、50%、70%、95%(V/V)乙醇溶液回流提取3次,趁热过滤,合并,减压浓缩定容至50 ml ......
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