董宜旋，李 静

    (山东中医药大学药学院，济南 250355)

    丹参酮ⅡA抑制同型半胱氨酸诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移及其机制研究

    董宜旋*，李静#

    (山东中医药大学药学院，济南250355)

    目的：研究丹参酮ⅡA抑制同型半胱氨酸(Hcy)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和迁移及其机制。方法：取VSMCs用于试验。在验证丹参酮ⅡA抑制Hcy诱导的VSMCs增殖和迁移试验(验证试验)中，将细胞分为对照组、Hcy组(1 000 μmol/L)及丹参酮ⅡA低、中、高剂量组(5、10、20μg/L)。在丹参酮作用机制试验(细胞通路试验)中，将细胞分为对照组、丹参酮ⅡA组(20μg/L)、雷帕霉素组(20 nmol/L)、MHY1485组(10 μmol/L)、丹参酮ⅡA+雷帕霉素组(丹参酮ⅡA，20μg/L+雷帕霉素，20 nmol/L)、丹参酮ⅡA+MHY1485组(丹参酮ⅡA，20μg/L+MHY1485，10 μmol/L)。验证细胞通路P70S6K和p-P70S6K的表达时，雷帕霉素(抑制试验)与MHY1485(激动试验)分别进行试验。酶标仪测定VSMCs的增殖，细胞划痕试验、Transwell法测定VSMCs的迁移，增强化学发光法测定VSMCs中P21、P27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、P70S6K和p-P70S6K的表达。结果：验证试验中，与对照组比较，Hcy组细胞24、48 h吸光度值，迁移面积和VSMCs穿透数量，MMP-2、MMP-9和p-P70S6K表达水平显著升高，P21、P27表达水平显著降低(P<0.01)；与Hcy组比较，丹参酮ⅡA低剂量组细胞48 h，中、高剂量组24、48 h吸光度值，MMP-2水平，低、中、高剂量组细胞迁移面积和VSMCs穿透数量，MMP-9和p-P70S6K表达水平显著降低，丹参酮ⅡA中、高剂量组细胞中P21、P27表达水平显著升高(P<0.01)；各组细胞P70S6K水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。细胞通路试验中，与对照组比较，丹参酮ⅡA、雷帕霉素组细胞24、48 h吸光度值，迁移面积和VSMCs穿透数量显著降低，MHY1485组24、48 h吸光度值显著升高(P<0.01)；与丹参酮ⅡA组比较，丹参酮ⅡA+雷帕霉素组细胞24、48 h吸光度值显著降低，丹参酮ⅡA+MHY1485组细胞12、24、48 h吸光度值，迁移面积和VSMCs穿透数量显著升高(P<0.01)。抑制试验中，与对照组比较，丹参酮ⅡA组细胞p-P70S6K表达水平显著降低(P<0.01)；与丹参酮ⅡA组比较、雷帕霉素、丹参酮ⅡA+雷帕霉素组细胞p-P70S6K表达水平显著降低(P<0.01) ......