张楠楠，朱志军，蒋亚超，邓 浩，高 松，李莹丽

    (河南中医学院药学院，郑州 450008)

    星点设计-响应面法优化五味子多糖的酶提工艺

    张楠楠*，朱志军#，蒋亚超，邓浩，高松，李莹丽

    (河南中医学院药学院，郑州450008)

    目的：优化五味子多糖的酶提工艺。方法：采用星点设计-响应面法，以溶液pH、酶用量、提取温度为响应因子，以五味子多糖的提取率为响应值，在单因素试验的基础上，采用3因素5水平星点设计进行试验；同时进行验证试验。结果：优化的最佳提取工艺条件为酶提溶液pH 5.7、酶用量1.3%、提取温度53℃；验证试验中五味子多糖的提取率为14.30%(RSD=1.84%，n=6)。结论：优化的提取工艺简便、合理、稳定，可用于五味子多糖的提取。

    五味子多糖；酶法提取；星点设计-响应面法

    五味子，习称北五味子，为木兰科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实[1]。五味子多糖是从五味子中提炼出来的混合物，其药理作用主要体现在保护肝脏[2]、增强免疫[3]、抗肿瘤[4]、抗疲劳[5]、抗超敏反应[6]等方面。五味子多糖的提取方法主要有溶剂提取法、微波提取法、超声提取法、酶提取法等[7]。本研究是课题组关于生脉散剂型转化的前期研究，因此，五味子多糖后续纯化不仅要求工艺方便快捷，还要避免提取过程中的损失，以为后续工业化生产提供条件。目前，工业化生产中五味子多糖的提取方法普遍采用水提法，但是水提法提取率相对较低，且耗费时间和能源[7-9]，例如孟宪军等[8]采用水提法得到五味子多糖的提取率仅为(10.99±0.33)%。因此，本研究拟采用其他提取方法辅助水提法提取多糖。研究显示，超声提取过程中多糖易分解[7]、微波提取能否提高多糖提取率仍存在争议[10]，且这2种方法在大规模工业生产中使用不方便。酶法提取具有条件温和、提取率高[11]、后续步骤易处理、可用于工业化生产等优点，故笔者采用目前常用的响应面法对酶提取法提取五味子多糖的工艺进行优化[12]，以为五味子多糖的工业化生产提供科学依据。

    1 材料

    1.1仪器

    T6新世纪型紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；SHA-C型水浴振荡器(巩义市予华仪器设备有限公司)；5439R型台式高速冷冻离心机(德国Eppendorf股份公司)；UPH系列超纯水机(四川优普超纯科技有限公司)。

    1.2药品与试剂

    无水乙醇、95%乙醇、丙酮、乙醚、浓硫酸、柠檬酸、柠檬酸钠(天津登科化学试剂科技有限公司)；重蒸酚(北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司 ......