兰 蕊，龚小保，黄利挂，陈 竹，曾 雪，张保顺#

    (1.西南大学药学院，重庆 400715；2.重庆医药高等专科学校药学系，重庆 400030)

    荧光光谱法测定3种黄酮类化合物与人血清白蛋白相互作用的机制研究Δ

    兰蕊1*，龚小保1，黄利挂1，陈竹2，曾雪2，张保顺1#

    (1.西南大学药学院，重庆400715；2.重庆医药高等专科学校药学系，重庆400030)

    目的：研究黄酮类化合物与人血清白蛋白(HSA)相互作用的机制，比较化合物B环不同取代基(羟基、甲氧基)对大分子物质结合的影响。方法：采用荧光光谱法对槲皮素、橙皮素、甲基橙皮素3种B环取代基不同的黄酮类化合物与HSA相互作用的规律进行研究，测定并分析3种黄酮类化合物与HSA发生荧光猝灭的类型，计算相应的结合常数、结合位点及热力学参数等。结果：随着温度的升高，猝灭常数(Ksv)均呈规律性下降，结合常数(KA)相应降低，结合位点数(n)近似等于1，热力学参数ΔH<0、ΔS>0，B环的取代基不同对大分子物质结合有影响。结论：3种黄酮类化合物与HSA相互作用发生荧光猝灭的机制属于静态猝灭；结合位点数为1；3种化合物与HSA之间的作用力以静电力为主；羟基可能为黄酮类化合物与大分子物质相互作用的主要活性基团，甲氧基与HSA的结合力小于羟基。

    黄酮；荧光猝灭；人血清白蛋白；机制

    人血清白蛋白(HSA)是人体血液循环中最为丰富的蛋白质，约占血浆总蛋白含量的60%，是药物运输的重要载体[1-2]。近年来，生物大分子与药物之间的结合作用成为研究热点。人体血液中每个配体与血浆蛋白结合的过程，对药动学和药效学均可产生一定的影响，如减轻药物毒性、延长半衰期等。因此，研究血清白蛋白与药物间的作用关系，探讨不同基团对两者相互作用的影响[3]，能更好地了解药物在体内的吸收和分布。

    自然界存在的黄酮类化合物具有重要药理活性，其广泛分布于植物的根、茎、叶和果实中[4]。目前关于黄酮或类黄酮类化合物与HSA发生荧光猝灭的机制研究，以及金属离子对药物与蛋白质亲和力的影响有较多报道，如徐倩等[5]采用荧光法和分子对接的方法研究黄酮类相互作用机制；兰玲等[6]利用荧光光谱法，发现大豆素和葛根素与HSA相互作用均发生荧光猝灭，且为静态猝灭过程，葛根素与HSA结合力强于大黄素。而针对多羟基黄酮类化合物中B环上的不同基团与HSA作用后所引起荧光猝灭的差异却少有报道。本研究通过荧光光谱法，在模拟人体pH条件下(pH 7.4)，定性地研究槲皮素、橙皮素和甲基橙皮素3种黄酮类化合物对HSA的荧光猝灭反应 ......