韩克胜，谢学立，田树红，邢桂兰，符 江，邢 俊，林春华，谭 鹏，邵继平#(1.海口奇力制药股份有限公司，海口 57016；.海南省药物临床前药理毒理学研究重点实验室，海口 571199)

    大鼠血浆中重组人钙调磷酸酶B亚基的ELISA双抗体夹心法测定及其药动学研究Δ

    韩克胜1*，谢学立2，田树红2，邢桂兰2，符 江2，邢 俊2，林春华2，谭 鹏2，邵继平2#(1.海口奇力制药股份有限公司，海口 570216；2.海南省药物临床前药理毒理学研究重点实验室，海口 571199)

    目的：建立大鼠血浆中重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的测定方法，并研究其药动学特征。方法：采用酶联免疫吸附(ELISA)双抗体夹心法，将1μg/ml的rhCNB单克隆抗体mAb包板，加入待测样品，再加入rhCNB多克隆抗体pAb(稀释比例为1∶5 000)和辣根过氧化酶(HRP)标记抗免疫球蛋白G(IgG)(稀释比例为1∶10 000)，以四甲基联苯胺显色，用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度(OD值)。测定6只大鼠iv 2.5 mg/kg rhCNB后2、15、30、60、120、240、480、720 min的血药浓度，以BAPP 3.0软件计算药动学参数。结果：rhCNB检测质量浓度的线性范围为0.195～12.5 ng/ml(r2=0.995 0)，定量下限为0.195 ng/ml，准确度为97.300%～103.622%(RSD均小于7.5%，n=6)；批内、批间和反复冻融3次的RSD均不大于8.5%(n=6、18、15)。该药在大鼠体内的药动学特征符合二室模型，AUC0-720 min为173.038 mg·min/L、t1/2为94.62 min。结论：建立的方法特异性强、灵敏度高、准确度及精密度好，可用于生物样品中rhCNB的定量检测和药动学研究。

    rhCNB多肽；酶联免疫吸附双抗体夹心法；大鼠；定量检测；药动学

    肝癌(Liver cancer)是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和病死率仅次于胃癌和食道癌，严重威胁了人民的健康和生命，其晚期患者往往无有效药物可用。目前临床上大多数抗肝癌药缺乏组织选择性，在发挥疗效的同时也产生严重的毒副作用，常见的有消化道反应、骨髓抑制、脱发等。因此，寻找高效低毒的新型抗肝癌药势在必行。

    钙调磷酸酶(Calcineurin，CN)是目前唯一一种依赖钙(Ca)/钙调素(CaM)的蛋白磷酸酶，由A、B亚基以1∶1组成异二聚体，其中A亚基(CNA)是催化亚基，B亚基(CNB)是调节亚基 ......