廖 杰，任晓婷，尹宗宁(四川大学华西药学院靶向药物与释药系统教育部重点实验室，成都 610041)

    ·制剂与工艺·

    载纳豆激酶的三甲基壳聚糖纳米粒的制备及体外释放度研究Δ

    廖 杰*，任晓婷，尹宗宁#(四川大学华西药学院靶向药物与释药系统教育部重点实验室，成都 610041)

    目的：制备载纳豆激酶(NK)的三甲基壳聚糖(TMC)纳米粒(TMC-NK-NPs)，并研究其体外释放度。方法：合成季胺化度分别为15%、20%、25%的TMC(即TMC15、TMC20、TMC25)，将其与NK自组装形成TMC-NK-NPs。测定TMC-NK-NPs的粒径、多分散系数(PDI)、Zeta电位，筛选TMC；观察并测定最优处方制备的TMC-NK-NPs的形态、包封率、载药量、4℃避光下30 d的稳定性、24 h内的体外累积释放度(Q)及NK活性。结果：采用TMC20所制TMC-NK-NPs的粒径较小[(161.0±4.8)nm]，PDI最小(0.204)，Zeta电位为(19.2±1.5)mV，呈球形或类球形；包封率为(45.4±1.51)%，载药量为(14.2±0.25)%；30 d内相对稳定；峰值Q12h为92.3%；NK活性在1 h时就达到最大(76.6%)，但随着时间延长，活性降低。结论：成功制得形态圆整、包封率与载药量较高，且具有较好缓释作用的TMC-NK-NPs。

    三甲基壳聚糖；纳豆激酶；纳米粒；体外释放度；制备

    血栓的形成是心脑血管疾病发病的主要原因，溶栓治疗是治疗血栓病最有效的方法[1]，目前主要治疗方法是静脉溶栓治疗。但临床应用的各种溶栓药物血浆半衰期短、靶向性不强，易引起体内出血等并发症[2]。纳豆激酶(Nattokinase，NK)作为一种新型溶栓药物，不仅在体内外有强烈的溶栓作用，而且还能诱导内源性溶栓[3]，但作为蛋白类药物，其在体内易降解失活。壳聚糖(CS)是自然界来源第二大丰富的亲水性多糖，生物相容性好，无不良反应，是良好的生物相容性材料[4]。其弱酸水溶液具有高黏性，带正电荷，已被广泛用于药物载体和医用辅料[5]。CS季胺化修饰后得到三甲基壳聚糖(TMC)，其在更广泛的pH范围内都具有良好的溶解性[6]。目前用于研究自组装载药纳米粒的蛋白有内皮生长因子、卵清蛋白、胰岛素等[7-9]。本研究采用NK与TMC自组装形成纳米粒(TMCNK-NPs)，通过将NK制备成纳米给药系统，可以提高其稳定性、延长其体内半衰期、避免出血等副作用，使其更有效地治疗血栓类疾病。

    1 材料 ......