王艳玲，黄晓巍，李 哲，何 璐，徐 岩，曲晓波(.吉林大学基础医学院，长春 300；.长春中医药大学药学院，长春 307)

    鹿茸多肽诱导心肌干细胞向心肌细胞分化的机制研究Δ

    王艳玲1*，黄晓巍2，李 哲1，何 璐1，徐 岩2，曲晓波2(#1.吉林大学基础医学院，长春 130021；2.长春中医药大学药学院，长春 130117)

    目的：探讨鹿茸多肽诱导心肌干细胞(CSCs)向心肌细胞分化的机制。方法：从SD大鼠体内分离CSCs，鉴定后培养传代至P3代后，分为空白对照组、5-氮胞苷诱导组(3 μmol/L)、鹿茸多肽诱导组(800 μg/ml)及其联合诱导组，除空白对照组细胞只加含3%胎牛血清的培养液外，其余各组细胞加入含相应诱导剂的培养液，培养14 d。采用免疫组化法检测细胞表面心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达，免疫印迹技术检测细胞cTnT、活化复制因子2(ATF-2)和肌细胞增强因子2C(MEF-2C)表达，实时定量聚合酶链式反应技术检测细胞cTnT和转录因子Nkx2.5、GATA4 mRNA表达。结果：成功制得CSCs，纯度>97%。与空白对照组(cTnT呈阴性)比较，各诱导组细胞cTnT呈阳性，cTnT、ATF-2、MEF-2C蛋白表达和cTnT、Nkx2.5、GATA4 mRNA表达均增强(P<0.05)。与5-氮胞苷诱导组比较，鹿茸多肽诱导组细胞cTnT、MEF-2C蛋白表达和cTnT、GATA4 mRNA表达均增强(P<0.05)，联合诱导组细胞cTnT、ATF-2、MEF-2C蛋白表达和cTnT、GATA4 mRNA表达均增强(P<0.05)。结论：鹿茸多肽可能通过增强Nkx2.5、GATA4、ATF-2、MEF-2C等转录因子的表达来诱导CSCs向心肌细胞分化。

    鹿茸多肽；心肌干细胞；心肌细胞；分化

    心肌细胞死亡多发于缺血性心脏病和心力衰竭患者，最终导致功能性心肌细胞受损[1-2]。因此，如何通过增加心肌细胞数量来促进心肌细胞再生，恢复心脏功能的研究具有重要的现实意义。随着细胞移植疗法研究的不断深入，心脏损伤疾病的治疗有了希望。心肌干细胞(CSCs)由于具有向心肌细胞分化的潜能和生理学特性，被认为是一个理想的种子细胞[3]。CSCs在移植后可以分化成为心肌细胞修复心肌组织损伤，因此其在心肌细胞替代治疗方面受到了广泛关注。但如何通过小分子药物激活患者的CSCs，让其充分增殖和分化，是CSCs研究的重点之一[4]。多种物质可诱导CSCs分化为心肌细胞[5]，但均存在不足。因此，发现新的诱导剂，建立稳定、安全、有效、定向诱导CSCs分化为心肌细胞的方法成为研究的重点 ......