孙志欣，张 莹(天津中医药大学第一附属医院急症病房，天津 300193)

    桔皮素对人肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭的影响及机制研究

    孙志欣*，张 莹(天津中医药大学第一附属医院急症病房，天津 300193)

    目的：考察桔皮素对人肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭的影响，并探讨其作用机制。方法：以0(空白对照组)、10、20、40、60、80μmol/L桔皮素分别作用于细胞24、48 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖率，并计算其半数抑制浓度(IC50)。以0、20、30 μmol/L桔皮素作用细胞48 h后，采用Transwell侵袭实验考察其对细胞侵袭的影响；并分别采用实时荧光定量聚合酶链式反应法和Western blot法考察其对细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Notch-1、免疫细胞表面抗原44(CD44)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA及其蛋白表达的影响；采用Western blot法考察蛋白激酶B(Akt)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)的磷酸化水平。结果：10～80μmol/L桔皮素对人肝癌HepG2细胞的体外增殖均具有明显的抑制作用，且呈时间和剂量依赖性，增殖率较空白对照组显著降低(P<0.05)，作用24、48 h后的IC50分别为55.7、23.4 μmol/L。20、30 μmol/L桔皮素作用48 h后，细胞侵袭能力明显受到抑制；细胞中N-cadherin、Vimentin、Notch-1、CD44和MMP-9 mRNA及其蛋白水平表达明显降低，E-cadherin mRNA及其蛋白表达水平明显升高，且Akt、GSK-3β磷酸化水平升高，较空白对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：桔皮素可抑制人肝癌HepG2细胞的体外增殖和侵袭；其机制可能与下调细胞中Notch-1表达、抑制细胞的上皮-间质转化而抑制CD44和MMP-9的表达，以及抑制其上游Akt-GSK-3β信号途径有关。

    桔皮素；人肝癌HepG2细胞；增殖；侵袭；上皮-间质转化

    肝癌是我国发病率最高的恶性肿瘤之一，且近年其发病率和病死率均有上升的趋势[1]。即使采取以手术为主、化疗和放疗为辅的方法进行综合治疗，其预后仍不理想[2]。目前，肿瘤转移仍然是肝癌患者死亡的最主要原因，也是困扰临床医师的主要问题之一[3]。天然黄酮类物质桔皮素(Tangeretin)广泛存在于芸香科植物川橘果皮、酸橙果皮和柑橘茎叶中，具有化痰消痞、理气和胃、抗真菌等功效[4-5] ......