雷成康，郭 玲(1.西安市食品药品检验所，西安 710054；2.陕西师范大学生命科学学院，西安 710119)

    ·药物分析与检定·

    2015年版《中国药典》环磷酰胺有关物质检测方法的验证与改进Δ

    雷成康1*，郭 玲2#(1.西安市食品药品检验所，西安 710054；2.陕西师范大学生命科学学院，西安 710119)

    目的：改进环磷酰胺有关物质的检测方法。方法：对2015年版《中国药典》收载的环磷酰胺有关物质检测的薄层色谱法(TLC)进行验证，并对该方法进行改进，以环磷酰胺有关物质A、B、C、D对照品为对照，以二氯甲烷-冰乙酸-甲醇-水(50∶25∶15∶12 V/V/V/V)为展开剂，以茚三酮试液为显色剂，进行有关物质检测试验及方法学验证。结果：原TLC法不仅无法检测到环磷酰胺有关物质B、C、D，且操作过程烦琐，不够环保。改进后的TLC法对环磷酰胺有关物质A的检测限约为0.05 μg，对有关物质B、C、D的检测限约为0.1 μg；方法专属性试验结果表明，环磷酰胺与各有关物质之间互不干扰，分离度良好。结论：改进的TLC法具有简便、环保、灵敏度高的优点，可用于环磷酰胺及其制剂的质量控制。

    环磷酰胺；有关物质；薄层色谱法；改进

    环磷酰胺(Cyclophosphamide)，分子式C7H15C12N2O2P· H2O，化学名为P-[N，N-双(β-氯乙基)]-1-氧-3-氮-2-磷杂环己烷-P-氧化物一水合物，是目前临床应用非常广泛的抗肿瘤药。环磷酰胺主要以二乙醇胺为起始原料，与氯化亚砜、三氯氧磷及氨基丙醇等经氯化、缩合、环合而成，其生产工艺对温度及反应时间有严格要求。若其生产过程中的关键因素控制不当会引起有关物质含量显著增加；另外，若其长期贮藏于30Ⅲ以上的环境中，则易失去结晶水，引起脱氯而呈黏稠状[1]。

    2015年版《中国药典》(二部)收载的检测环磷酰胺有关物质的方法为自身稀释对照的薄层色谱法(TLC)[2]，该方法不针对任何特定物质。而已知的环磷酰胺有关物质有4种，分别为有关物质A、B、C、D，其中有关物质A、B既是工艺杂质也是降解杂质；而有关物质C、D一般在贮藏过程中产生。据文献报道，环磷酰胺有关物质A为二(2-氯乙基)胺盐酸盐，具高毒性，大鼠腹腔半数致死量(LD50)为100 mg/kg，小鼠皮下LD50为20 mg/kg，对人亦有致突变作用[3]。其他3种环磷酰胺有关物质毒理学资料暂缺，但就药品质量控制而言，仍有必要对其含量进行检测。

    经检索有关环磷酰胺质量研究文献[3-9] ......