刘 荣(上海市公共卫生临床中心药剂科，上海 201508)

    荧光光谱法和分子对接研究拉米夫定、依非韦伦、替诺福韦与牛血清白蛋白的相互作用及机制Δ

    刘 荣*(上海市公共卫生临床中心药剂科，上海 201508)

    目的：研究拉米夫定、依非韦伦、替诺福韦与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用及其机制。方法：通过荧光光谱法研究不同温度下不同浓度的拉米夫定、依非韦伦、替诺福韦与BSA的结合反应，分别测定其荧光强度，根据Stern-Volmer方程等公式计算动态猝灭常数(KSV)、表观猝灭常数(Kq)、结合常数(KA)、结合位点(n)和热力学焓变(ΔH)、自由能变(ΔG)、熵变(ΔS)，并运用Sybyl 6.7 Flex X模块建立这3种药物与BSA的分子对接模型。结果：3种药物与BSA相互作用的Kq均大于2.0×1010L/(mol·s)，且随温度的升高而降低，n均接近于1，其热力学函数ΔG<0、ΔS<0、ΔH<0。分子对接模型显示，3种药物主要与BSA的Sudlow部位Ⅰ亚结构域发生结合。结论：3种药物与BSA之间存在相互作用，荧光猝灭方式以静态猝灭为主，结合反应为自发分子作用过程，结合作用力均以氢键和范德华力为主。荧光试验和分子对接研究结果一致，两者可相互补充。

    拉米夫定；依非韦伦；替诺福韦；牛血清白蛋白；荧光光谱法；分子对接

    血清白蛋白(SA)作为循环系统中最丰富的可溶性蛋白，在所有蛋白质中一直是研究最广泛的一类[1]。SA能够与许多内源性和外源性物质(如药物、氨基酸、脂肪酸、胆红素、胆汁酸、甲状腺素等)结合，起到存储和转运的作用[2-5]。在药动学(吸收、分配、代谢和排泄)中，由于在血浆中的大多数药物都与人血清白蛋白(HSA)结合，所以HSA控制着药物的分配过程，因而HSA在药动学研究中具有重要意义。前人已经做过很多这方面的研究，如Chaudhuri S等[6]通过荧光光谱法和分子对接模型研究了血红蛋白与抗氧化非瑟酮和3-羟基黄酮的相互作用；Sandhya B等[7]通过荧光光谱法、圆二色性(CD)和三维荧光研究了司他夫定与HSA的相互作用；Bocedi A等[8]通过荧光光谱研究抗人类免疫缺陷病毒(HIV)药物与HSA的结合情况。

    在临床治疗中，抗HIV药物的反转录酶抑制剂能够有效抑制耐药病毒株，具有较好的抗病毒作用，目前临床已形成了稳定且有效的联合治疗方案，即高效抗反转录病毒治疗(Highly active antiretroviral therapy，HAART)。替诺福韦(Tenofovir，TFV)和拉米夫定(Lamivudine ......