仲智勇，时保军，周 辉，王文博(河北医科大学第二医院小儿外科，石家庄 050017)

    重组人p53腺病毒注射液对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡及自噬的影响Δ

    仲智勇*，时保军，周 辉，王文博(河北医科大学第二医院小儿外科，石家庄 050017)

    目的：研究重组人p53腺病毒注射液对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法：将肾母细胞瘤细胞分别与高、中、低浓度(1×109、1×108、1×107VP/mL)的重组人p53腺病毒注射液共同孵育20 h，以不加注射液的细胞为空白对照。检测细胞增殖、周期、凋亡及相关基因p21、Bax蛋白表达，检测细胞中自噬相关基因LC-3、Atg7、Atg12表达和自噬体数量。结果：高、中、低浓度重组人p53腺病毒注射液对肾母细胞瘤细胞的增殖抑制率分别为(42.86±3.18)%、(33.64±7.25)%、(16.26±9.07)%，细胞凋亡率分别为(53.85±9.36)%、(37.35±9.64)%、(23.64±10.65)%。与空白对照比较，高、中、低浓度药物作用下G0/G1期细胞均增加，其中高、中浓度药物效果较明显(P<0.05或P<0.01)；高浓度下细胞中p21、Bax蛋白和LC-3、Atg7、Atg12基因表达增强，自噬体数量增加(P<0.01)；中浓度下细胞中Bax蛋白表达增强(P<0.05)，其余指标无明显变化(P>0.05)。结论：重组人p53腺病毒注射液可抑制肾母细胞瘤细胞增殖，诱导细胞凋亡和自噬。

    肾母细胞瘤；重组人p53腺病毒注射液；细胞周期；增殖；凋亡；自噬

    肾母细胞瘤是儿童常见的恶性肿瘤性疾病之一，发病率在小儿肿瘤中高居第5位，手术切除并予以辅助化疗是其主要治疗手段[1]。但对于病理分型为间变型等的肾母细胞瘤预后不良型的治疗，受到目前临床治疗手段的限制，疗效一直不稳定[2]。

    重组人p53腺病毒(rAd-p53)注射液是以现代生物医学工程技术为基础，通过生物重组而制备的一类具有代表性的病毒颗粒注射液。有研究表明，rAd-p53注射液可以通过调节细胞凋亡过程对多种肿瘤起到治疗作用[3-4]。近年研究发现，自噬与细胞的凋亡有着密切的联系，二者可以相互调控。本文主要研究rAd-p53注射液对肾母细胞瘤细胞增殖、凋亡及自噬的影响。

    1 材料

    1.1 仪器

    CKX41倒置显微镜(日本Olympus公司)；DM0412低速离心机(美国赛洛捷公司，离心半径：4 cm)；LSM 880激光共聚焦显微镜(德国Zeiss公司)；JEM-1400透射电镜(日本JEM公司)；Tanon 5500化学发光仪(上海天能科技有限公司)；Multiskan MK3酶标仪、ABI7500荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)仪(美国Thermo公司)；FACSCantoⅡ流式细胞仪(美国BD公司) ......