吴小斌，王洛临，李洁环，钟如帆，袁柳萍，郭 鸣(.广州中医药大学，广州 50405；2.广东省中医药工程技术研究院/广东省中医药研究开发重点实验室，广州 50095)

    三黄益肾方的纯化工艺研究Δ

    吴小斌1*，王洛临2#，李洁环1，钟如帆1，袁柳萍1，郭 鸣1(1.广州中医药大学，广州 510405；2.广东省中医药工程技术研究院/广东省中医药研究开发重点实验室，广州 510095)

    目的：研究三黄益肾方的纯化工艺。方法：以纯化后澄清液中总多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷保留率和除杂率为指标，分别考察水提醇沉法(50%、60%、70%乙醇)和澄清剂法(101果汁澄清剂、ZTC天然澄清剂、壳聚糖澄清剂)的纯化效果，以筛选三黄益肾方纯化方法；设计正交试验对最优纯化方法的工艺参数(药液质量浓度、澄清剂用量和药液pH)进行优化，并进行验证试验。结果：纯化方法中以壳聚糖为澄清剂时纯化效果较优，综合评分为98.62；优化后工艺参数为药液质量浓度1 g/mL、1%壳聚糖溶液用量2 mL/g、pH 5.1；验证试验中总多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷保留率和除杂率平均值分别为79.56%、78.11%、79.46%、32.18%(RSD分别为1.24%、0.97%、1.03%、1.16%，n＝3)。结论：采用壳聚糖为澄清剂对三黄益肾方纯化效果较好，且操作简单，优化后工艺稳定、可行。

    三黄益肾方；纯化工艺；正交试验；黄芪甲苷；总多糖；毛蕊异黄酮葡萄糖苷；壳聚糖；澄清剂

    三黄益肾方是广东省第二中医院临床用方剂，由熟地黄、黄芪、大黄、茯苓等药材组成，具有补益气血、活血化瘀、泻下祛浊等功效，主要用于慢性肾病的早期治疗，原剂型是煎剂，现计划开发成服用方便的颗粒剂。方中主要活性成分为多糖，如黄芪多糖、熟地黄多糖和茯苓多糖等。现代中药药理研究表明，中药多糖具有补益气血、增强免疫的作用[1]，能改善肾病所致气血亏虚等症状；同时黄芪中的皂苷类成分也具有改善肾功能作用[2]，黄芪中的黄酮类成分(指标性成分为毛蕊异黄酮葡萄糖苷等)具有调节机体免疫力及改善肾相关功能等作用[3]；大黄中蒽醌类等成分具有泻下通便作用，还可防治慢性肾病的并发症[4]。

    本方现采用水提工艺，得膏率约为35.42%，日服生药量较大；同时提取液中鞣质类(大黄含有鞣质)、蛋白质、果胶等成分较多，会影响后续制剂的稳定性，故需要对提取液进行纯化研究。本课题组考察了传统的水提醇沉工艺与澄清剂絮凝澄清工艺的纯化效果[5]，并设定醇沉工艺中乙醇体积分数分别为50%、60%、70% ......