柱后衍生阳离子交换色谱法同时测定新疆产贝母中17种氨基酸的含量Δ
水解,1材料,2方法与结果,3讨论
艾则孜·莫合买提,沙丽娜,阿布力米提·伊力(.中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐 800;2.中国科学院研究生院,北京 0009;.新疆食品药品检验所,乌鲁木齐 80000)柱后衍生阳离子交换色谱法同时测定新疆产贝母中17种氨基酸的含量Δ
艾则孜·莫合买提1,2,3*,沙丽娜3,阿布力米提·伊力1(1.中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐 830011;2.中国科学院研究生院,北京 100039;3.新疆食品药品检验所,乌鲁木齐 830000)
目的:建立同时测定新疆产贝母中17种氨基酸含量的方法。方法:采用阳离子交换色谱柱分离17种氨基酸;采用柱后衍生阳离子交换色谱法测定药材中17种氨基酸的含量:色谱柱为LCAK 06/Na柱,流动相A为柠檬酸三钠11.9 g、柠檬酸6 g、苯酚1 g,加水溶解,再加65 mL甲醇和6 mL浓盐酸,加水定容(调pH至3.4),流动相B为柠檬酸三钠11.9 g、氢氧化钠2.8 g、苯酚1 g、硼酸5.0 g,加水溶解并定容(调pH至10.8)(梯度洗脱),流速为0.45 mL/min(A泵)、0.25 mL/min(M泵),检测波长为440 nm(脯氨酸)、570 nm(其余氨基酸),进样量为50 μL。结果:天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸和脯氨酸检测浓度线性范围均为20~400 nmol/mL(除胱氨酸10~200 nmol/mL)(r均大于0.989 0);精密度、重复性、稳定性试验的RSD<2.0%;检测限除胱氨酸外(0.08 nmol/mL)其余氨基酸均为0.16 nmol/mL;加样回收率为98.5%~99.5%(RSD为0.06%~0.21%,n=6)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于新疆产贝母中氨基酸含量的同时测定。
贝母;氨基酸;柱后衍生化;阳离子交换色谱法
贝母是一种常用的药材,百合科Lilianceae贝母属Fritillaria多年生草本植物,其鳞茎可供药用,具有清热化痰、润肺止咳等功效,可用于肺热咳嗽、胸闷痰黏等症的治疗。在新疆分布量比较丰富的有新疆贝母F. walujewii Rgl[1-2]、伊犁贝母F.kpallidiflora Schrenk[3-4]、轮叶贝母F.tortifolia、黄花贝母F.verticillata、大白花贝母F.verticillata var.albidoflora、裕民贝母F.yuminensis、滩贝母F.karelinii和小花贝母F.meleagroides等 ......
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